Фотоокисляването на парентерални мултивитамини предизвиква чернодробна стеатоза в
Резюме
Фотоокисляването на мултивитаминните разтвори води до генериране на пероксиди. Тъй като пероксидите са свързани с чернодробна стеатоза и фиброза, както и с холестаза, ние поставихме под въпрос дали мултивитамините участват в чернодробните усложнения на парентералното хранене. Новородените морски свинчета са разделени на групи, получаващи интравенозно или общо парентерално хранене, фотозащитено или не, или контролен разтвор (5% декстроза + 0,45% NaCl), допълнен с: а) мултивитамини; б) мултивитамини с фотозащита; в) мултивитамини без рибофлавин; или г) пероксиди (H 2 O 2, терт-бутил хидропероксид). След 4 дни от черния дроб се вземат проби за хистология и нива на изопростан-F 2α, маркери на радикална атака. Мултивитамините, както и общото парентерално хранене са свързани със стеатоза (оценена 0-4), тежестта на която е намалена (p 2+ и Cu + чрез реакции на Fenton/Haber-Weiss. В допълнение, може да се очаква, че антиоксидантните компоненти на парентерални мултивитамини предпазват от свободните радикали, получени от пероксиди, генерирани в TPN разтвори (12).
Целта на това проучване е да се оцени ролята на мултивитамините в чернодробните усложнения, свързани с TPN, документирани от хистологията, и да се отдели ефектът от излагането на светлина от този на пероксидите и/или свободните радикали.
МЕТОДИ
Животински модел.
Под кетамин/ксилазин, 3-дневни бебешки морски свинчета (Чарлз Ривър, Монреал, Квебек, Канада) бяха снабдени с 0,4 мм полиуретанов катетър (Luther Medical Products, Tustin, CA, USA) във външната югуларна вена и екстериоризирани. в областта на лопатката. Катетърът беше свързан със система за непрекъснат поток, позволяваща мобилността на животните, които бяха настанени отделно в пластмасови кутии с дъна от телена мрежа. Животните се държат в термоконтролирана среда с 12-часов цикъл светлина/тъмнина и се хранят изключително интравенозно при 240 ml/kg/ден. След 4 дни животните бяха умъртвени и черният дроб беше разделен на аликвотни части с проби, съхранявани във формалин за хистология или нарязани и съхранявани при -80 ° C до анализ за триглицериди и изопростани, индекс на радикална атака (17). Изследването е проведено в съответствие с насоките на комитета за животни на съоръжението.
Този животински модел е избран поради предишното ни непубликувано наблюдение на мастна чернодробна болест при бебешки морски свинчета. За да се провери дали тази стеатоза може да бъде предотвратена чрез фотозащита, трябваше да се повторят същите експериментални условия.
Протоколи
За да се отдели ефектът от мултивитамините и светлината, животните са инфузирани с един от следните режими, съдържащ мултивитаминен разтвор в концентрация, подобна на тази, използвана при неонатално парентерално хранене. Фотозащитата беше постигната чрез приготвяне на разтворите на тъмно, покриване на инфузионния комплект с непрозрачен материал и използване на фотозащитна интравенозна тръба (13), предоставена от любезното съдействие на Baxter Canada.
MVP + светлина: 1% (обем/обем) MVP (Sabex, Boucherville, Квебек, Канада), незащитена от околната светлина, разредена в контролен разтвор (50 g/L декстроза + 4,5 g/L NaCl + 1 единица хепарин/mL); 5 ml MVP съдържа следното: витамин А, 2300 IU; витамин D, 400 IU; а-токоферол, 7 IU; витамин К, 200 µg; аскорбат, 80 mg; тиамин, 1,2 mg; рибофлавин, 1,4 mg; пиридоксин, 1,0 mg; пантотенат, 5 mg; фолиева киселина, 0,14 mg; цианокобаламин, 1 ug; никотинамид, 17 ug; биотин, 20 ug; и добавки манитол и полисорбат като емулгатори.
MVP - светлина: 1% (обем/обем) Фотозащитен MVP, разреден в контролния разтвор.
TPN + светлина: Два разтвора, незащитени от околната светлина, се вливат в смесена конфигурация „обратен прасец“ близо до мястото на инфузия: а) контрол + 9,6 g/kg/d аминокиселини (Travasol, Baxter Canada, Mississauga, Ontario), Канада) + 2% MVP при 120 ml/kg/d; б) контроли + 9,6 g/kg/d аминокиселини + 7,6 g/kg/d липиди (Intralipid 20%, Pharmacia, Peapack, NJ, САЩ) при 120 ml/kg/d; за крайна концентрация (при 240 ml/kg/ден) от 1% MVP + 4,8 g/kg/ден аминокиселини + 3,8 g/kg/ден липиди. Съставът на режима на NPT е изчислен от препоръките за проучвания при възрастни морски свинчета (18).