Електрофореза на серумен протеин - CSID Какво се случва Доктор
Главна информация
Серумните протеини изпълняват различни функции в тялото:
• източник на хранене;
• компоненти на буферни системи;
• имунологични агенти (имуноглобулини);
• носеща роля, осигуряваща транспорта на определени йони и молекули (хаптоглобин, преалбумин, трансферин);
• роля на регулиране на активността на различни протеолитични ензими (антипротези: алфа1-антитрипсин, алфа2-макроглобулин);
• роля в регулирането на онкотичното налягане2.
Настоящият метод за разделяне на серумни протеини, използван в лабораториите по медицинска биохимия, е електрофорезата. Използват се твърди опори и алкално рН, при което всички протеинови компоненти се зареждат отрицателно и мигрират към положителния полюс. На електрофореграмата след оцветяването протеините се появяват под формата на ленти, чиято оптична плътност се измерва, като всяка лента има максимална абсорбция. Чрез електрофореза при гореспоменатите условия се получават пет фракции: серумен албумин, a1, a2, b, g - глобулини3. Някои системи за електрофореза могат да диференцират зона b в две отделни ивици b1 и b2, като по този начин се получават общо 6 протеинови фракции.
Албуминът, a1 и b се появява под формата на хомогенни, добре дефинирани ивици. a2 и g се появяват като дифузни ленти, а фракцията g представя в централната си част по-интензивно оцветена област2.
Препоръки за електрофореза на серумен протеин - откриване на моноклонални гамапатии; оценка на серумните протеини и хранителния статус3.
прибиране на реколтата
Обучение на пациента - на гладно (на гладно) или след хранене1.
Събран образец - sange1.
Контейнер за прибиране на реколтата - вакуутан без антикоагулант със/без сепаратор гел1.
Необходима е обработка след прибиране на реколтата - серумът се отделя чрез центрофугиране1.
Обем на теста - минимум 0,5 ml ser1.
Причини за отхвърляне на доказателствата - хемолизиран серум.
Тествайте стабилността - отделеният серум е стабилен 4 дни при стайна температура или една седмица при 2-8 ° C1.
Метод и интерпретация на резултатите
Метод - електрофоретичен (в агарен гел), последвано от денситометрично сканиране на получените фракции 1 .
Референтни стойности - са зависими от 2-годишна възраст
В случай на система, която разделя 6 фракции, се използват следните референтни стойности:
Тълкуване на резултатите 3
За да се улесни интерпретацията на резултатите, ще бъде описана всяка от 5-те фракции с съставните протеини.) 2
Албумин
Намаленият серумен албумин (хипоалбуминемия) се проявява при различни патологични състояния и има различни значения (недохранване, малабсорбция, нефротичен синдром, новообразувания). Увеличаването на албумина се случва след дехидратация. В специални случаи се открива допълнителна лента в зоната на миграция на албумин поради някои генетични вариации без клинично значение (алоалбуминемия и бизалбуминемия).
Зона a1 отразява по-специално серумната концентрация на алфа1-антитрипсин, така че намаляването на тази фракция се открива в дефицита на алфа1-антитрипсин, свързан с някои белодробни заболявания (емфизем с ранно начало) и черния дроб (неонатален хепатит). Повишаването се регистрира при всички възпалителни реакции ("реагент с остра фаза"). В редки случаи получаването на допълнителна широка лента в тази област може да предполага наличието на алфа-фетопротеин.
Зона а2 той се състои от 2 протеинови компонента: алфа2 макроглобулин и хаптоглобин.
Повишен a2 се среща при остри инфекции, остър ревматоиден артрит, артериит, нефротичен синдром, диабет, новообразувания; намаляването на тази фракция може да се установи при тежък остър панкреатит, хепатоцелуларни лезии, дисеминирани синдроми на вътресъдова коагулация, хемолитични анемии, мегалобластни анемии.
Зона б той се състои от 2 отделни ивици: b1, съответстващи на трансферин и b2, който включва фракциите на комплемента С3 и С4. Третият компонент на тази зона е бета-липопротеин, чиято лента може да се припокрива с тази на трансферин или С3 или може да се намира в бета-гама зоната.
Серумните нива на b глобулин увеличават желязодефицитната анемия и билиарната цироза и намаляват автоимунните заболявания (СЛЕ), нефрозата, чернодробните заболявания, новообразуванията, острите и хронични инфекции. В някои случаи на множествен миелом от тип IgA, в тази област може да се установи наличието на моноклонален компонент.
Зона ж Гама-глобулините са най-важните глобулини. Тази категория включва имуноглобулини (IgG, IgA, IgM, IgD и IgE). Претърпените от тях аномалии се превеждат или от различни дефицити, или от поликлонална или моноклонална хипергамаглобулинемия.
Процентът на g глобулини намалява при агамаглобулинемия, хипогамаглобулинемия и нефротични синдроми. Хипогамаглобулинемията може да бъде вродена или придобита и може лесно да бъде открита чрез електрофореза на серумен протеин, когато концентрациите на основните 3 класа имуноглобулини са ниски (IgG, IgA и IgM). Наличието на хипогамаглобулинемия при възрастни изисква допълнителни изследвания, за да се открие възможно лимфопролиферативно заболяване (миелом с леки вериги, хронична лимфоцитна левкемия, лимфоми).
Поликлоналните увеличения на гамаглобулини показват хроничен имунен процес, свързан с чернодробно заболяване (хроничен активен хепатит, цироза), колагенова болест (SLE, ревматоиден артрит), новообразувания (напр. Болест на Ходжкин), хронична миело-моноцитна левкемия. В тези случаи хипергамаглобулинемията се дължи на активирането на голям брой клонове на плазматични клетки, които освобождават имуноглобулини. Трябва да се спомене характерният външен вид на бета-гама „мостовата“ алкохолна цироза, визуализиран върху гела като интензивно оцветена зона между бета и гама зоните.
Понякога в гама зоната можете да видите някои малки, тесни ленти, наречени олигоклонални, открити при пациенти с хепатит, заболявания на имунния комплекс, синдром на придобита имунна недостатъчност, ангиоимунобластичен лимфом.
Моноклоналните гамапатии включват голям брой клинични и биологични състояния, обикновено свързани със злокачествени заболявания (множествена миелома, болест на Waldenström, амилоидоза, лимфоми), но също така и с някои доброкачествени състояния или дори отсъствие на патологична промяна (моноклонални гамапатии с неопределено значение). В тези случаи се открива моноклонален компонент (М лента) при протеинова електрофореза, резултат от пролиферацията на единичен плазмоклетъчен клон. На гела моноклоналните компоненти се появяват под формата на тесни, ясно дефинирани ленти и след денситометричното сканиране се получават характерни „пикове“, които могат да бъдат намерени навсякъде между алфа и гама зоните, поради променливата електрофоретична подвижност, най-много но често в гама зоната.
Моноклоналните имуноглобулини са структурно и биохимично хомогенни, съставени от един вид лека верига (капа или ламбда). Пълните имуноглобулини или само техните субединици (например леки моноклонални вериги, наречени Bence-Jones протеини) могат да бъдат пуснати в циркулацията. Наличието на моноклонален компонент ще бъде посочено в крайния анализ на бюлетина на пациента, с препоръка да се извърши електрофореза на серумен протеин с имунофиксация 1-3 .
Таблицата по-долу обобщава представената информация: