ДНК на вируса на варицела-зостер (VZV) (кръв, ликвор, околоплодни води) - Synevo

Главна информация

Вирусът варицела-зостер (VZV) е част от семейство Herpesviridae; съдържа двуверижна ДНК, разположена централно и заобиколена от плик 6 .

VZV причинява дермални везикуларни лезии, които са клинично изразени като варицела (първична инфекция) или херпес зостер (реактивация). Първичната инфекция се проявява особено при деца под 10-годишна възраст от генерализиран везикулозно-пустулозен обрив, който в повечето случаи се самоограничава. При имунокомпрометирани деца кожните елементи са по-многобройни, често имат хеморагична основа, лекуват се по-трудно и понякога са суперинфектирани с Грам-положителни бактерии 3; 5; 6 .

Усложненията на варицелата са редки и засягат предимно ЦНС и белите дробове. Неврологичните аномалии включват остра церебеларна атаксия, енцефалит, менингит, напречен миелит. Церебеларната атаксия (разпространение 1 на 4000 случая) най-често се развива в рамките на 1 седмица от появата на обрива, но може да се появи дори след 21 дни. При децата обикновено е доброкачествено усложнение, което отшумява в рамките на 2-4 седмици; чрез PCR техники VZV-ДНК може да бъде открита в цереброспиналната течност. По-сериозно усложнение е енцефалитът, който е придружен от смъртност от 5-20% и неврологични последствия при 15% от оцелелите. Също така, тежко усложнение, което често се случва при възрастни и имунокомпрометирани пациенти, е пневмония от варицела (диспнея с тахипнея, кашлица, треска, интерстициални рентгенологични промени), което може да бъде фатално за бременни жени през втория или третия триместър на бременността 6 .

Ако първичната инфекция се появи през първите 28 седмици от бременността, съществува 1-2% риск от увреждане на плода (синдром на фетална варицела или вродена варицела). VZV-ДНК може да бъде открита чрез PCR техника в околоплодната течност; тестът има много висока чувствителност, но ниска специфичност за синдром на фетална варицела. Не са съобщени обаче случаи на увреждане на плода във връзка с неоткриваема VZV-ДНК в околоплодната течност. Рискът от вродена варицела е висок, ако наличието на VZV-ДНК в амниотичната течност е придружено от предполагаеми ултразвукови промени 1 .

Ако инфекцията на майката се случи навреме, съществува значителен риск от варицела при новороденото, със смъртност до 30% 1; 6 .

След първична инфекция с VZV, вирусът продължава в латентно състояние в сензорните ганглии на гръбния корен на гръбначните и черепно-мозъчните нерви. Реактивациите се случват при 10-20% от възрастните, по-често след 50-годишна възраст и се проявяват чрез едностранно обрив на пикочния мехур с дерматомално разпределение 5. При херпес зостер може да има клинично изразено увреждане на ЦНС като менингоенцефалит или енцефалит. Рядко усложнение, което се появява след херпес зостер офталмикус, е церебрална грануломатозна ангина. При имунокомпрометирани хора еволюцията на херпес зостер е по-тежка и по-дълга. Пациентите със злокачествена лимфопролиферация имат повишен риск от разпространение на кожата и висцерални увреждания (пневмония, хепатит и менингоенцефалит) 6 .

Характерните лезии обикновено предполагат диагноза херпес зостер. Въпреки това, както вирусът на херпес симплекс (HSV), така и вирусите на Coxsackie могат да причинят дерматомални везикуларни лезии. За диференциална диагноза може да се използва откриването на вирусна ДНК в лезии, което е по-бързо и по-чувствително от изолирането на вируса в клетъчните култури. .

Препоръки за определяне на VZV - ДНК - диагностика на VZV инфекции; така:

VZV - ДНК в кръвта: ранно откриване на сложни VZV инфекции при пациенти с тежка имуносупресия (напр. Пост-медуларна трансплантация), за да се започне антивирусно лечение 3; 6 .
VZV - ДНК в лезия: диференциална диагноза на кожни лезии 4; 6 .
VZV - ДНК на CSF: диагностика на синдроми на ЦНС, свързани с VZV (чувствителност и специфичност> 95% за херпес зостер без херпес, асептичен менингит, енцефалит, напречен миелит, васкулит на ЦНС, церебелит); пациентите с неврологични синдроми без съпътстващ обрив имат най-голяма полза от тестването; PCR тестът е по-полезен при диагностицирането на неврологични усложнения на варицелата; за синдроми на ЦНС, свързани с херпес зостер, са необходими повече данни в подкрепа на полезността на теста, тъй като VZV-ДНК е открита в цереброспиналната течност на пациенти с неусложнени кожни инфекции 2 .
VZV - ДНК в околоплодната течност: диагностика на фетална инфекция с VZV 1; 6 .

Обучение на пациента - не се изисква 3 .

Събран образец - а) ще дойде кръв; б) продукт, взет от лезията върху сух тампон; в) цереброспинална течност, събрана чрез лумбална пункция; г) околоплодна течност 3 .

Контейнер за прибиране на реколтата - а) вакуутан, съдържащ EDTA като антикоагулант; б) буфер без транспортна среда; в) и г) стерилен контейнер 3 .

Количество реколта - а) доколкото вакуумът позволява; в) и г) минимум 2 мл 3 .

Необходима е обработка след прибиране на реколтата - а), в), г) доказателствата не ще се центрофугира 3 .

Причини за отхвърляне на доказателствата - а) стари, коагулирани, хемолизирани проби; използване на хепарин като антикоагулант 3 .

Тествайте стабилността - кръвни проби от лезията, ликвор или околоплодна течност са стабилни за 1 седмица при 2-4 ° C 3 .

Метод - PCR Light-Cycler в реално време: верижна полимеризационна реакция с откриване в реално време на натрупания PCR продукт, чрез измерване на излъчената флуоресценция (качествен тест) 3 .

Референтни стойности - VZV - неоткриваема ДНК 3 .

Граница на откриване - 10 деца/проба 3 .

Тълкуване на резултатите

Откриването на VZV-ДНК в различни патологични продукти подкрепя клиничната диагноза на инфекция, дължаща се на този вирус 5 .

Граници и смущения

Отрицателният резултат не премахва възможността за инфекция с VZV, особено на ниво 5 на ЦНС .

1. Ашраф Фоуда. Варицела по време на бременност. www.obgyn.net/educational-tutorial. Ref Ref: Интернет комуникация.

2. Гай Бойвин. Диагностика на херпесвирусни инфекции на централната нервна система. В HERPES 11, Допълнение, 2004.

3. Лаборатория Синево. Специфични препратки към използваната работна технология 2015 г. Тип на справка: Каталог.

4. Mark J. Espy et al. Диагностика на вирусни инфекции на варицела-зостер в клиничната лаборатория чрез LightCycler PCR. В J Clin Microbiol. 2000 септември; 38 (9): 3187–3189.

5. Клиника Майо. Mayo Medical Laboratories. Тестов каталог: Варицела-зостер вирус (VZV), молекулярно откриване, PCR. www.mayomedicallaboratories.com. Ref Ref: Интернет комуникация.

6. Ричард Дж. Уитли. Вирус на варицела. В Mandell, Douglas, and Bennett’s Principles and Practice of Infectious Diseases, 7th edition, Churchill Livingstone, Elsevier, 2010, 1963-1968.