Биохимичните признаци на нарушена функция на кобаламин оказват влияние върху хематологичните

• субекти
• абстрактно
• Заден план:
• Методи:
• Резултати:
• Заключение:
• Основна
• Резултати
• Демография и хранене
• Състояние на кобаламин и фолиева киселина за новородени
• Хематологични параметри при кърмачета
• дискусия
• Заключение
• Методи
• Проучете популацията и дизайна
• Вземане на кръв и биохимичен анализ
• Статистически анализ
• Отчет за финансова подкрепа
• Разкриване

субекти

абстрактно

Заден план:

Докато дефицитът на желязо е най-честата причина за анемия при бебета, дефицитът на кобаламин се характеризира предимно със забавяне на развитието и типичната макроцитна анемия е ограничена до тежък и дълготраен дефицит на кобаламин в тази възрастова група. Хематологичните параметри са оценени при 4-месечни бебета с биохимични данни за нарушена функция на кобаламин, които са участвали в рандомизирано, контролирано проучване за намеса на кобаламин на 6 седмици.

Методи:

Сто деветдесет и седем бебета бяха избрани на случаен принцип, за да получат или 400 µl интрамускулна инжекция. g кобаламин или не е получена интервенция на 6 седмици. Хематологичните параметри и състоянието на кобаламин и фолиева киселина бяха определени при включване и 4 месеца.

Резултати:

Добавянето на кобаламин подобрява всички маркери за нарушена функция на кобаламин, но няма ефект върху броя на хематологичните клетки след 4 месеца (P> 0,18). Признаци на еритропоеза с ограничена желязо се наблюдават на 6 седмици и 4 месеца. Най-силните предсказатели за нисък статус на желязо са мъжкият пол на 4 месеца и висок процент наддаване на тегло от раждането.

Заключение:

При кърмачета с биохимични признаци на нарушена функция на кобаламин добавката не подобрява броя на хематологичните клетки. Вариациите в параметрите на червените кръвни клетки изглежда са свързани главно със състоянието на желязото в тази възрастова група.

Детството е период, белязан от бърз растеж с повишена нужда от няколко микроелемента и последващ риск от недостиг на хранителни вещества (1). Недостигът на желязо и кобаламин се открива при кърмачета с предимно кърмене (1, 2). Докато дефицитът на желязо е най-честата причина за анемия при кърмачета (3), дефицитът на кобаламин се характеризира главно със забавяне на развитието в тази възрастова група (2, 4). Съобщава се, че бебетата с маргинален дефицит на кобаламин имат нормални хематологични стойности (5, 6), а панцитопенията и макроцитната анемия се наблюдават главно при тежък и дългосрочен дефицит на кобаламин (2).

Оценката на храненето при кърмачета може да бъде трудна поради обширните физиологични промени през първите месеци от живота, което затруднява интерпретацията на обичайните лабораторни параметри (2, 7). Серумният кобаламин намалява значително през първите няколко седмици и остава нисък през първите 6 месеца, докато серумният фолат се увеличава и остава висок през първата година от живота (8). Тези промени са придружени от повишаване на метаболитните маркери хомоцистеин (tHcy) и метилмалонова киселина (8). Добавката на кобаламин променя всички маркери за нарушен статус на кобаламин към профил, наблюдаван при по-големи деца и възрастни, богати на кобаламин, което предполага, че високите нива на THC и метилмалонова киселина, съобщени при голяма част от кърмачетата, които първо са кърмени, не отразяват незрял метаболизъм, но по-скоро твърде малко кобаламин Кобаламин-зависимите реакции се поддържат напълно (9).

Скоростта на синтеза на хемоглобин и производството на еритроцити намалява драстично през първите дни след раждането и достига минимум през втората седмица от живота. Поради потисната еритропоеза и съкратената продължителност на живота на феталните еритроцити (60–70 дни), нивото на хемоглобина (Hb) и броят на еритроцитите достигат най-ниските си стойности след раждането

2 месеца след раждането (10, 11). Размерът на еритроцитите, определен от средния обем на клетките (MCV), намалява и е най-малък на 6 месеца, след което постепенно се увеличава (10). Докато нормалните параметри на еритроцитите, като нивата на Hb и MCV, отразяват средните стойности на популация от еритроцити със средна продължителност на живота 120 дни, съдържанието на ретикулоцитен хемоглобин (CHr) предоставя оценка в реално време на еритропоезата през предходните 24 до 48 години (12). Тази полза прави CHr полезен по време на бързи физиологични промени и се предполага, че CHr е най-добрият предиктор за дефицит на желязо при кърмачета и превъзхожда традиционните параметри на желязото като серумен феритин и наситеност на трансферина (7).

Преди това извършихме рандомизирано контролирано проучване за намеса на кобаламин с предимно кърмени бебета на възраст 6 седмици с биохимични данни за нарушена функция на кобаламин (9). В тази статия ние докладваме ефекта от добавката на кобаламин върху хематологичните параметри при кърмачета на 4-месечна възраст. Целта на това проучване е да се изследва дали метаболитният профил, който показва увреждане на функцията на кобаламин, е свързан с производството на хематологични клетъчни линии през първите месеци от живота.

Резултати

Демография и хранене

Изследваната група включва 107 здрави бебета на възраст 6 седмици, 56 момчета (52%), които са родени по време на раждането (средна гестационна възраст 39, 9 (SD 1, 3) седмици) и са с подходящо за възрастта тегло (средна гестационна възраст 3, 578). SD 506) ж). Няма значителни разлики между кобаламин и контролни групи въз основа на демографски данни за бебета и майки при включване и проследяване (P> 0,05), а данните за общата група са в Изброена таблица 1 . Използвани са два различни вида формули, обогатени с желязо (0.7-0.8 mg на 100 ml приготвена формула) и кобаламин (0.13-0.2 μg на 100 ml приготвена формула). Използвани са различни видове каши, всички от които са обогатени с желязо (4, 8-11, 1 mg на 100 mg прах). Нито едно дете не е получавало добавки с желязо.

Средното процентно увеличение на теглото от раждането е 39% (SD 14%) на 6 седмици и 95% (SD 26%) на 4 месеца. Корелацията на Spearman корелира процентното увеличение на теглото на 6 седмици (r = -0, 44, P 0, 06).

Средната възраст на майките е била 31,5 (SD 4,8) години, а 63 от 104 майки са многородени със среден брой 1,4 (диапазон, 1-4) по-ранни деца. 38 от 104 майки съобщават, че приемат железни добавки всеки ден за по-кратки или по-дълги периоди по време на бременност. Две от майките бяха вегетарианки, а останалите съобщиха за всеядна диета, въпреки че девет майки казаха, че рядко или никога не ядат месо (n = 6) или риба (n = 3).

Състояние на кобаламин и фолиева киселина за бебета

Публикувано е подробно описание на състоянието на кобаламин и фолиева киселина (9). Средното серумно ниво на кобаламин след 6 седмици е 170 (134–255) pmol/l, а средното плазмено tHcy е 7,59 (6, 21–9, 28) μmol/l; Не са наблюдавани значителни разлики в нивата на витамин и метаболит между кобаламин и контролни групи. След 4 месеца групата на кобаламин имаше 75% по-високо средно ниво на серумен кобаламин от контролната група и средното ниво на tHcy беше намалено с 39%, но остана непроменено в контролите, което предполага метаболитен отговор на кобаламин Допълнението показва.

Хематологични параметри при кърмачета

Връзка доза-ефект между процентното наддаване на тегло от раждането до 4 месеца с ( а ) съдържанието на ретикулоцитен хемоглобин (CHr) и ( б ) средният клетъчен обем (MCV) за 4 месеца чрез обобщени адитивни модели. Кривите доза-отговор са показани като плътни линии с 95% доверителни интервали като пунктирани линии.

• Изтеглете слайда PowerPoint

След 6 седмици ретикулоцитозата е обратна на нивата на Hb (r = -0,62, P0,06)).

Връзка доза-ефект между ( а ) Ниво на хемоглобин (Hb), ( б ) среден клетъчен обем (MCV) и ( ° С ) Съдържание на ретикулоцитен хемоглобин (CHr) за брой ретикулоцити от 6 седмици според обобщените адитивни модели. Кривите доза-отговор са показани като плътни линии с 95% доверителни интервали като пунктирани линии.

• Изтеглете слайда PowerPoint

дискусия

При предимно кърмени бебета с биохимичен профил, който показва увреждане на функцията на кобаламин, добавката на кобаламин оказва силно влияние върху метаболитните маркери на състоянието на кобаламин след 6 седмици (9), но няма влияние върху хематологичните параметри след 4 месеца. Високият процент на наддаване на тегло след раждането и мъжкият пол са основните фактори, определящи хематологичните параметри и са свързани с по-нисък желязо. Ретикулоцитозата е свързана с ниски MCV и CHr и през 6 седмици, и през 4 месеца, което показва съществуването на еритропоеза, ограничена от желязо през първите няколко месеца от живота при главно кърмачета.

Формалните ограничения на дизайна на изследването включват липсата на ослепяване на изследователите и майките към инжектирането на кобаламин и липсата на плацебо инжекция в контролната група. Ние обаче не считаме тези фактори за важни за хематологичния изход при кърмачета на 4 месеца.

Използвани са микробиологични тестове за определяне както на серумен фолат, така и на кобаламин. През последните няколко години конкурентните тестове за луминесценция на свързване стават все по-популярни, но микробиологичният тест все още се счита за златен стандарт за серумен фолат (13). Докато микробиологичният тест определя биологично активен кобаламин, тестовете за луминисценция с конкурентно свързване включват и функционално неактивни аналози на кобаламин. Последните проучвания показват, че конкурентните свързващи тестове за луминисценция могат да покажат широко разпространена дисфункция, особено когато се съобщават фалшиви нормални стойности за дефицит на кобаламин (14).

При тези малки кърмачета броят на ретикулоцитите е обратно корелиран с нивата на Hb и е свързан с ниски MCV и CHr показатели за желязо-ограничена еритропоеза (26). За разлика от възрастните, при които ниските нива на Hb поради дефицит на желязо обикновено се свързват с нормален или намален брой на червените кръвни клетки (27), висок брой на червените кръвни клетки се наблюдава при бебета на възраст от 6 до 48 месеца с желязодефицитна анемия (28). Ретикулоцитозата, наблюдавана в тази възрастова група, е лека спрямо тежка анемия, която се дължи на тежък дефицит на желязо, свързан с дизеритропоеза, което може да намали броя на оцелелите червени кръвни клетки (28).

Заключение

При кърмачета с биохимични данни за нарушена функция на кобаламин добавката на кобаламин е имала подчертан ефект върху вътреклетъчните метаболитни маркери на кобаламиновия статус след 6 седмици, но не е оказала ефект върху хематологичните параметри след 4 месеца. При тези предимно кърмени бебета високият процент наддаване на тегло и мъжкият пол са основните фактори, определящи хематологичните параметри и са свързани с по-нисък статус на желязо след 4 месеца. Необходими са по-нататъшни проучвания на състоянието на микроелементите при млади, главно кърмачета.

Методи

Проучете популацията и дизайна

Между декември 2004 г. и април 2006 г. 107 здрави 6-седмични бебета, включително три двойки близнаци, и техните 104 майки са били наети от местната здравна служба в Берген, Норвегия и са били включени в проучване за намеса на кобаламин. Публикувано е подробно описание на методите и резултатите от изследването (9). Налични са хематологични данни за 107 бебета на 6 седмици и 102 бебета на 4 месеца и тези деца са включени в този анализ.

Въпросник за храненето на бебета и майки, добавки с витамини, параметри на растеж, паритет и консумация на тютюн при майките беше попълнен след 6 седмици и 4 месеца. Тъй като всички използвани различни видове адаптирано мляко и каша съдържат желязо, адаптираното мляко за кърмачета е определено като изключително кърмено спрямо не изключително кърмено, което включва комбинирано кърмене и хранене с адаптирано мляко, самостоятелно хранене с адаптирано мляко и двете комбинирани с твърда храна.

Кърмачетата са рандомизирани на блок до 400 µl интрамускулно инжектиране. g Хидроксикобаламин (витамин В12 депо; Nycomed Pharma, Asker, Норвегия) (n = 54, група на кобаламин) или не е назначен за лечение (n = 53, контролна група). Лабораторният персонал, отговорен за изтеглянето и анализирането на кръвта, е бил сляп за групиране.

Етичното одобрение на протокола беше дадено от регионалния комитет по етика на медицинските изследвания, а майките дадоха информирано информирано съгласие. Това проучване е регистрирано в ClinicalTrials.gov под номер NCT00479479.

Вземане на кръв и биохимичен анализ

Кръвни проби бяха получени на 6 седмици и 4 месеца чрез антекубитална венепункция и събрани в вакуумни тръби EDTA (Becton Dickinson, Franklin Lakes, NJ). Хематологичните параметри (Hb, MCV, еритроцити, широчина на разпределение на червените кръвни клетки, CHr, левкоцити и тромбоцити) бяха анализирани в рамките на 4 часа с автоматизиран хематологичен анализатор (ADVIA 120; Bayer Diagnostics, Tarrytown, NY). Налични са ретикулоцитни индекси (ретикулоцити и CHr) за субпопулация на изследваната група (n = 62 от 107 за 6 седмици, n = 72 от 102 за 4 месеца и n = 58 от 102 сдвоени данни за 6 седмици и 4 месеца). .

Кръвните проби, използвани за производството на EDTA плазма, се поставят в ледена вода и плазмата се отделя в рамките на 4 часа. Плазмените нива на tHcy и метилмалонова киселина бяха изследвани с помощта на метод на газова хроматография-масспектрометрия, основан на дериватизацията на метил хлороформат (29). Серумът се получава чрез събиране на кръв във вакуунерни епруветки без добавка (Becton Dickinson). Серумният кобаламин се определя с микробиологичен анализ на Lactobacillus leichmannii (30), а серумният фолат с микробиологичен анализ на Lactobacillus casei (31).

Статистически анализ

Резултатите са представени като среден и интерквартилен диапазон, както и средната стойност и SD. Медианите са сравнени с теста на Wilcoxon Signed Rank и теста Mann-Whitney U и средните стойности с теста Student Student. Разликите в категориалните променливи бяха тествани с тест 2 тест.

Корелацията на Spearman е използвана за оценка на връзката между процентното наддаване на тегло и теглото при раждане и връзката между хематологичните параметри на 6 седмици и 4 месеца. Няколко модела на линейна регресия бяха използвани за оценка на връзката на хематологичните параметри на детето (Hb, MCV и CHr) на 4 месеца с намеса на кобаламин, пол, процентно наддаване на тегло от раждането до 4 месеца, хранене на бебета и употреба на желязо добавки от майката от 6 седмици до 4 Месеци

Взаимоотношенията доза-отговор на нивата на Hb, MCV и CHr при брой ретикулоцити от 6 седмици и процентното увеличение на теглото на CHr и MCV за 4 месеца бяха графично представени от обобщени адитивни модели.

Обобщените адитивни модели бяха изчислени с помощта на софтуерния пакет mgcv (версия 1.4-1) в R (Die R-Stiftung für Statistisches Rechnen, версия 2.8.1; Виена, Австрия), а за статистическия пакет SPSS (версия 18) беше разработен за който използва останалите статистически оценки. P-стойности от двете страни

---