46589310-микробиология-изпит-usmf - Безплатно изтегляне на PDF
Кратко описание
Описание
Понятие Понятия за микро или микроорганизъм ганизъм изми. д. Категория Категории таксономични мишки, д, видове безклетъчни видове безклетъчни и клетъчни. повторно. Особено разграничени между микроорганизмите микроорганизми са прокариотните и еукариотните изми. Mi/o = микроскопични организми (микро-нанометри) + водорасли, протозои, вируси, субвирусни агенти (приони), микроскопични гъби (гъби, гъби) Mi/o класификации: фенотипни (първи опит - Carl von Linne) генотипни филогенетика (на базата на изследване на вкаменелости или HLA) Таксономични групи: домейн царство клон клас ред семейство род вид Инфраспецифични таксони в рамките на вида, които показват определени разлики: биовар (биохимична/физиологична активност) биохимия/физиологичен) серовар (структура Ag) патовар (степен на патогенност) лизовар (чувствителност към бактериофаги) антибиовар (чувствителност към AB) Ролята на инфраспецифичните таксони: епидемиологични маркери! Класификация Mi/o: ацелални клетъчни форми (вируси, вироиди, приони) клетъчни форми: бактерии = прокариоти, eubct 1) G2) G + 3) mico micopl plas asme me (устна (липсващ компютър) PC) археи = прокариоти, PC без пептидогликан, местообитание при екстремни условия eukarya = еукариоти (гъби, протозои) 1
8. Структура Бактериална клетъчна структура. бактериална. Изброяване Изброяване на елементите, които те постоянно са постоянни te (задължителни (задължителни) orii) и neperman непостоянни ente (незадължителни (незадължителни) ii) на структурна структура. а. Цитоплазматична мембрана и цитоплазма. Структура, химичен състав и биологични функции. Методи за подчертаване. Постоянни елементи: постоянни: PC, MCt, Ct, нуклеоиди, рибозоми, мезозоми G + (E, цитохроми) Непостоянни елементи: капсула, спора, флагели, фимбрии, плазмиди, MCt клетъчни включвания: мозаечна течност Singer липсва холестерол, съдържа стеролоподобни хопаноидни молекули, по-богати на прот. отколкото еукариотите множество функции (при еукариотите, изпълнени от органели) PBP - транспептидна катализа и PC синтез пермеат - транспорт prot. система. на секреция рецептори Респираторна верига Роля MCt: 1. Полупропусклива бариера, селективна проста дифузия, улеснена 2. Пермеат активен транспорт 3. E метаболитна активност 4. Meta Metabo болести lism sm ene енергийна енергия rget 5. Част Partic icip ipaa la diviz división iune neaa celul celular araa 6. Sint Sintez ezaa PG si fos fosfo foli lipi pide delo lor r • •
Компонент: PG (триизмерен) 40-80% ac. teichoici (фиксиран от NAG), ак. липотейхоен (фиксиран от MCt) = полимери на рибитол, глицерол-фосфат; o отрицателен електричен заряд o трансфер на йони otion Ag o комплементация активация на комплемента o стимулация на секреция на цитокини o междуклетъчна адхезия prot. асоцииран компютър или Streptococcus pyogenes = прот. M o Staphylococcus aureus = прот. A (коефициент на слепване), прот. Еднородни фибронектинови крепежни елементи Дебелина 80 nm
10. Бактериална клетъчна стена, функции. Структурни характеристики на клетъчната стена на грам-отрицателни бактерии. оцветяване
Грам. Техника и механизъм за оцветяване. Важна практика. Примери за грам отрицателни бактерии. PC G-:
Компоненти: PG (двуизмерен) 1-10% MEx: съществуването на места за общуване между MEx и MCt роля в транспорта o Prot. мажор: порини, рецептори (пили, фаги) или Prot. второстепенен: Това е улавянето и транспортирането на субст. LP Braun = обединява Mex и PG MEx стабилизация LPZ (най-необичайният компонент) MEx стабилизация o Липид А - намира се в MEx; ендотоксин (стимулира секрецията на цитокини) o Miex PZ - транспортира някаква субстиция; AgR полова специфичност o Lant O (OZ) - отрицателна бременност, предотвратява фагоцитозата; Специфичност на видовете AgO N.B. Bct имат способността да модифицират структурата на AgO способност да заблуждават имунната защита Нехомогенна Дебелина 12 nm Периплазматично пространство: E и prot. фиксирана от MCt Роля e: хидролиза, PC синтез, детоксикация (напр. бета-лактамази) бета-лактамази)
1. Тинтява виолетово Ct виолетово 2. Измийте с вода, обработете с пръст. Lugol (йод) образуване на неразтворим комплекс виолетово-йоден фиксиране на багрилото в клетките 3. Лечение Обработващи зони с алкохол алкохол 95% 95% 3
отстраняване на багрилото от bct G- по-големи пори в PG, по-високо съдържание на липиди (разтворим в алкохол), ниско киселинно рН поддържане на багрилото в bct G + по-малки пори, ниско съдържание на липиди алкохол дехидратира стената и намалява диаметъра на порите 4. Оцветяване с водна фуксия Резултат: G-: червено, G +: лилаво Използване на Грам оцветяване: Диагноза, Чувствителност към AB Специфични, осмотично чувствителни форми: Protoplast = G +, без PG Sferoplast = G-, MCt + MEx, частично без PG Форми L = bct липид на PC, поради AB, (i) обратима Mycoplasma - без PC, осмотично устойчива повишена устойчивост MCt; плейоморфна форма o
11. Особености на структурата и химичния състав на клетъчната стена на киселинно-устойчиви бактерии. Оцветяване на Ziehl-Neelsen.
Мелиране на спори: оцветяване след AUJESZKY 14. Капсула за бактерии. Химични композитни и биологични функции. Положителни и отрицателни методи за оцветяване на капсулата. Примери
Конюгативни купчини - капилярни структури от протеинов характер, присъстващи в брой от 1-10 на клетка (кодирани от конюгатни плазмиди F). Роля на конюгиращите пили: 5
1. трансфер на ДНК трансфер чрез конюгация 2. R за някои бактериофаги Осветяване на клетки: електронна микроскопия 16. Индиректни методи за изследване на подвижността на бактериите. Приготвяне на местни ястия. Методи за изследване. принцип
микроскопия на черен фон и броя на фазовите лъчи. Изследване на местни препарати "окачена капка" или "между слайд" (фазова контрастна микроскопия или на черен фон). Засяване на бактериалната култура в полутвърда среда (наблюдава се мътност) Растеж на културата "във воал" на повърхността на твърдата среда 17. Гранули на волутин. Химичен състав и биологични функции. Методи за осветяване. Оцветяване по Loeffler и Neisser.
19. Морфология и ултраструктура на микоплазми и хламидии. Методи за изследване. Патогенни видове. Микоплазмите са бактерии: ограничени само от триламинирана мембрана и без твърда клетъчна стена, както и генетичната информация, необходима за синтеза на специфични за стената прекурсори. Малки и полиморфни форми Култивира се върху безклетъчна среда и културата се инхибира от специфични антитела. Той се умножава в цикъл, който редуващо включва удължаването и фрагментирането на нишковидни форми в кокоидни форми и тяхното разделяне. Изследва се в зависимост от локализацията на инфекцията, храчките или назофарингеалния ексудат, урината, взети чрез тазова лапароскопия. Директната микроскопия не струва нищо, обичайното оцветяване не може да открие микоплазми поради малкия си размер. и имунофлуоресцентното оцветяване не даде задоволителни резултати. Изолация и идентификация. Оцветяването на Dienes, колониите на микоплазмите са оцветени в лилаво и покрити с ламели, които могат да бъдат изследвани чрез потапяне. •
Консерванти. Асепсис означава защита от микроорганизма. Антисептиката означава унищожаване на микроорганизми върху инструментите за обработка. Филтрацията е преминаване на течност през поресто тяло - филтър.Филтрите с удобна порьозност могат да се отърват от филтрирания течен микроорганизъм, който се задържа механично и електростатично в порите на филтъра. Прилага се за стерилизация на въздуха, микробни културни среди, лекарства, които не издържат на нагряване. Видове филтри: Класически порцеланов или инфузионен под във формата на кухи свещи от вътрешната страна и затворени в единия край (филтърни тапи) азбестови филтърни плочи, импрегнирани с каолин (филтър на Seitz или поресто стъкло (филтър на Шот)). целулозен ацетат с порьозност между 8 и 0,025 µm. Филтрацията се извършва чрез аспирация или положително налягане (приспособено към спринцовка) За да се избегне запушване на порите, суспензиите с висока плътност на частиците са предварително филтрирани от влакнест или гранулиран материал. химикали) Вещества, използвани за съхранение на препарати 7
Вещество Област на приложение Концентрация% Фенол Имунни серуми, Ваксини 0,3-0,5% Натриев мертиолат Имунни серуми, инжекции 0,004-0,02 Фенол + мертиолат Имунни серуми, Капки за очи 0,2 + 0,005; 0,002 + 0,01 Натриев бензоат Мехлеми, емулсии, храни 0,2-1 Консервиране от физически агенти: Пастьоризация - Нагряването до 62-85 ° унищожава вегетативните форми, а не спорите. Незабавното охлаждане при 4 ° C чрез термичен удар завършва микробицидния ефект. Охлаждането при 4 ° C се използва широко. Замразяване - Минималният антимикробен ефект при охлаждане под евтектична точка (-21,3 ° C) предотвратява образуването на ледени кристали. Или в течен азот (196 ° C). Лиофилизация - Изсушаването се използва в микробиологията за неопределено запазване на щамовете на някои спорообразни бактерии. Лиофилизацията се използва за запазване на микроорганизми, имунни серуми и биологични реактиви. По същество това е криодезик. 23. Микробен метаболизъм. Особености. Бактериални ензими. Класификация, роля в микробната физиология. Практическо приложение
по тип дишане. Примери. Класификация на бактериите според енергийния източник фототрофи - използвайте слънчева енергия (фотосинтеза) хемотрофи - използвайте енергия, отделена от химични реакции на окисление-редукция. Те се нуждаят от субстрат за донор на водород (e- и H +) и субстрат за акцептор на водород. 8
хемолитотрофи - H донор = неорганично вещество хемоорганотрофи - H донор = органично вещество (глюкоза, липиди.) • Патогенните бактерии са хемоорганотрофни Механизми за получаване на енергия в хемоорганотрофите в зависимост от крайния акцептор на H: Аеробно дишане. Крайният акцептор е кислородният газ. Включва дихателната електронна транспортна верига, свързана с MCt. Краен продукт - H2O или H2O2. Анаеробно дишане. Крайни акцептори - неорганични съединения (нитрат, сулфат, S). Транспорт на електрони през дихателната верига. Крайни продукти - нитрит, амоняк, сулфид (в присъствието на O - H2O2). Ферментация. Органичният субстрат се метаболизира без намесата на външен окислител. Състои се от вол-червени процеси, които извършват само частично окисление на субстрата, като донорът и акцепторът на Н + са органични вещества. Това води до по-малък субстрат до по-окислена молекула (например млечна ферментация, алкохолна ферментация, смесена киселина, ацетоинова и др.). Ферментацията може да се осъществи в присъствието на O2, но без негова намеса. Класификация на бактериите според енергийните и въглеродните източници: фотоавтотрофи (слънчева енергия, CO2); фотохетеротроф (en. sol., subst.org); хемоавтотрофни; хемохетеротрофни (хемолитохетеротрофни, хемоорганохетеротрофни). •
26. Растеж и размножаване на бактерии. Фази на размножаване на периодични (прекъснати) култури от бактерии. Култура на бактерии
течни и твърди среди. MC = твърди разтвори/субстрати, осигурява хранителни вещества и физико-химични условия за култивиране bct. Те могат да се използват за: култивиране (изолиране) на бактерии; Тестване на AB чувствителност; съхранение или транспорт на бакрейски култури. Изисквания за MC: а. Хранителни и енергийни нужди bct 9
оптимална влажност оптимално рН (7,2-7,4) и постоянна (буферен характер) оптимален потенциал за окислително-редукционен потенциал (анаеробна - rH210) изотонична (0,5% NaCl) стерилна и прозрачна
28. Бактериологичен метод в диагностиката на инфекциозни заболявания. Целта. Взето от пациенти и околната среда. Принципите на
Етап IV - ОЦЕНКА НА РЕЗУЛТАТИТЕ, ФОРМУЛИРАНЕ И ИЗПУСКАНЕ НА ОТГОВОРА
Новобиоцин Новобиоцин, хинолони (налидиксинова киселина, ципрофлоксацин, офлоксацин) - блокират активността на топоизомеразите, намесвайки се в конформацията на ДНК. Бактерициден ефект. Сулфамидите и триметопримът нарушават синтеза на фолиева киселина и фолати (кофактори в синтеза на АН). Бактериостатична активност. Производство на AB: AB: Биологичен метод; Синтетичен метод; Полусинтетичен метод Етапи на биологичния метод: 1. Култивиране на продуциращи щамове (напр. Penicillium notatum, Actinomyces griseum и др.) В подходяща течна среда 2. Екстракция на AB 3. Пречистване и концентрация на AB 4. Контрол на токсичността 5. Определяне на активността на AB AB се измерва в единици за маса (g, mg, µg) или действие (AU). 1 AU - минималното количество AB, което инхибира растежа на референтен щам при стандартни условия. Пеницилин - 1UA = 0,6 µg чисто вещество Изисквания за AB: Селективна токсичност; Терапевтичен ефект с минимални дози; Дългосрочна дейност; Тесен спектър на действие; Бъдете разтворими и лесно се абсорбират; Не предизвиквайте странични ефекти; Не развивайте резистентност към AB; Бъдете евтини
34. Понятия за чувствителни, междинни и устойчиви на антибиотици бактериални щамове. Методи за определяне на чувствителността
микроби към антибиотици: дифузиметрия (шайби), последователни разреждания. Понятие за минимална концентрация на инхибиране (MIC) и минимална бактерицидна концентрация (CMB). Чувствителност на микробите към АВ В зависимост от клиничните резултати, бактериите се разделят на 3 класа: чувствителни към AB (S), резистентни (R) и междинни (I, умерено чувствителни). Щамове S - терапевтичен ефект се получава с обичайни терапевтични дози Щамове R - терапевтичен ефект не може да се получи с терапевтични дози Щамове I - терапевтичният успех е непредсказуем. Това би било възможно с високи дози или с локално приложение на АВ. Всеки изолиран щам показва особена чувствителност. Може да се изследва в лаборатория, за да се определи профилът на чувствителност на този щам, който представлява антибиограма. Тестване на чувствителността на бактериите към AB дифузионен метод (шайби). Често се използва при често срещани инфекции. а