Визуализиране на ефектите от положителен ранен опит, тактилна стимулация върху дендрита

Обобщение

Тази статия описва процедурите за тактилна стимулация на малки и след оцветяване на Golgi-Cox в невроналната морфология. Тактилната стимулация е положително преживяване, което се прилага в перинаталния период чрез поглаждане на малките с домакинска кърпа. Оцветяването с Golgi-cox е надеждна процедура, позволяваща визуализация на цели неврони.

ефектите

Резюме

Въведение

Протокол

Всички експерименти са проведени в съответствие с Канадския съвет за грижа за животните и одобрени от Университета в Летбридж, Комитет за грижа за животните.

А. Развъждане и тактилна стимулация

  1. Премахнете язовирите от клетките им и ги поставете във временна клетка с храна и вода. Поддържайте язовира и временната клетка в помещението за разплод/отглеждане.
  2. Претеглете малките като група преди сутрешната сесия за тактилно стимулиране (09:00 ч.). За всяка сесия плъховете транспортират кученцата в отделни тестови камери за тактилна стимулация. Поставете клетката на къщата върху нагревателна подложка, която е настроена на 24 ° C.
  3. Използвайте твърда дъска, за да разделите клетката на къщата на две половини. Поставете малките в групата на стимулационната половина и контролирайте кученцата в другата половина. Задайте таймер за 15 минути.
  4. С помощта на мек прах, почиствайте едновременно всички малки в групата за тактилна стимулация в продължение на 15 минути подред. Млади еноти (

2. Жертва и оцветяване на Голджи-Кокс

  1. При приблизително P100, приложете предозиране на натриев пентобарбитал чрез IP инжекция на плъхове и инфузирайте интракардиално с приблизително 100 ml 0,9% физиологичен разтвор.
  2. Екстрахирайте мозъка, когато инфузията завърши. Извадете мозъка от черепа, изрежете зрителния нерв под напрежение, за да запазите малкия мозък непокътнат; изследователите могат да изберат да запазят или премахнат ароматните крушки. Поставете извлечените мозъци в непрозрачна бутилка Nalgene с 20 ml разтвор на Golgi-Cox 14.
  3. Дръжте мозъка в разтвор на Golgi-Cox в продължение на 14 дни. След 14 дни заменете говеждото разтвор на Голджи с 30% разтвор на захароза. Дръжте мозъка в разтвор на захароза в продължение на 2-5 дни преди рязане.