Урина N
Чрез определяне на активността на урината N-ацетил-Я-D-глюкозаминидаза (NAG-żz), ние изследвахме дали има връзка между диабетичния метаболитен статус и ранните промени в тубулната функция. Състоянието на 12 деца със захарен диабет (на възраст 3-17 години) е последвано от клинично лечение поради дисбаланс на метаболизма на въглехидратите (СН), което изисква клинично лечение. За да опишем състоянието на метаболизма на СН, разработихме система за точкуване, която включваше дневна нужда от инсулин/тегло, тип инсулин, медиирана и променлива глюкоза в кръвта и нарушения на бъбречната функция. Глюкозата в кръвта се измерва 2-4 пъти на върха на пръста с D-Cont. Общо 27 активност на NAG в урината е определена при 12 деца въз основа на действителния креатинин в урината (NAG индекс). Установена е линейна връзка между индекса на NAG на пикочния канал/горната граница на нормата (относителния индекс на NAG) и специфичната за диабета средна стойност (r: 0.691). В този ранен период успяхме да открием тубулопатия с различна тежест при пациенти, при които традиционните стойности на бъбречната функция все още бяха нормални и микро-албуминурията обикновено не беше или е малко по-късно.
| Ключови думи: диабет, NAG индекс на урината, бъбречна функция- | |
| ciu, тубулопатия, метаболизъм на СН | |
Диабетната нефропатия при диабет тип I е приблизително 40% честота. В дългосрочен план това се показва от повишени концентрации на албумин в урината (1), трансферин (2,3), α-1-микроглобулин (3), аланин аминопептид (AAP), гама-глутамилтрансфераза (GGT) (4). От клинична гледна точка е важно още по-рано да се открият обратими тръбни увреждания, напр. чрез измерване на активността на урината N-ацетил-β-D-глюкозаминидаза (NAG-2) (5,6,7). Може да се проследи и ефектът от промените в диатетичното метаболитно състояние върху бъбреците.
Многобройни публикации през последното десетилетие показват, че когато се наруши метаболитният баланс на диабета, тъканите и нервната система могат да бъдат засегнати от тежки и чести събития (8,9,10,11,12,13). Ранното откриване на диабетна нефропатия е последвано от активност на NAG в урината при деца, нуждаещи се от клинично лечение, от началото до разрешаването на диабетната криза.
Пациенти и методи
Дванадесет деца със захарен диабет са проучени по време на периода на клинично лечение, изискващо клинично лечение поради разпадането на метаболизма на въглехидратите (СН). Броят на децата е 7: 5, възрастта на децата е 3-17 години, а делът на новодиагностицираните и вече обгрижвани деца е 6: 6. В периода на изследване беше поставена ясна диагноза MODY (диабет с начална зрялост при млади), другото дете имаше диабет тип I. За да опишем равновесното състояние на метаболизма на СН, ние разработихме точкова система, в която пренебрегнахме възрастта, пола, вида на диабета и времето на съществуване на децата. Разгледани са следните параметри: дневна нужда от инсулин, вид инсулин, дневни колебания на глюкоза в кръвта, средна стойност на кръвната глюкоза и стойности на бъбречната функция. Те бяха претеглени, както е посочено в таблица 1, и този център на тежестта беше използван при сравнението.
Вземането на проби за кръвна глюкоза се извършва 2-4 пъти от капиляра на върха на пръста, определянето се извършва с устройства за измерване на кръвната захар (D-Cont видове), използвани в грижите. Тъй като стойностите на HbA1c характеризират метаболизма на СН в продължение на дълъг период от време, неговата промяна не е изследвана в хода на кризата, а само в хода на последващите грижи. За оценка на бъбречната функция са използвани серумна урея и креатинин. Уреята се определя с помощта на хуманен комплект, модифициран от креатинина метод на Jaffe (14).
Откриването на ранни тубулни увреждания беше определено общо 27 пъти от първата сутрешна урина, за да се определи активността на NAG. За да се елиминира ефектът от дневната екскреция, активността на NAG се изразява по отношение на действителния креатинин в урината (NAG индекс). Активността на NAG в урината беше определена с р-нитрофенил N-ацетил-Я-D-глюкозаминид субстрат чрез модификация на метода Horak (7). Урината се съхранява при -20 ° С, центрофугира се при 1000 g в продължение на 5 минути след размразяване и супернатантата се пречиства чрез гел-филтрация върху колона със сефадекс G-25 (8 х 1,5 cm). 0,5 ml от филтрата се инкубира в продължение на 15 минути при 37 ° С след инкубация в продължение на 5 минути с 0,1 ml субстрат, приготвен в 0,5 ml цитратен буфер, рН 4,4. Реакцията се спира с 2 ml 0,1 М Na-борат и ензимната активност се определя спектрофотометрично при 400 nm.
Тъй като индексът на NAG на урината зависи от възрастта, ние използвахме коефициент на горната граница на индекса NAG/нормалния диапазон (относителния индекс NAG) за характерното тубулно увреждане и го изследвахме с линейна мярка на диабетичния фокус.
Резултати
Състоянието на въглехидратния метаболизъм на 12 деца със захарен диабет (на възраст 3-17 години) се характеризира с ежедневни нужди от инсулин, тип инсулин, дневни колебания на кръвната захар, дневни лекарства за кръвна захар и бъбречна функция. Вземайки ги предвид сериозно, както е посочено в таблицата, ние получихме фокус, който е клинично характерен за диабетичното състояние на пациента, метаболитно разстройство на СН. Този резултат варира от 4,3 до 18,5 при пациентите, които изследвахме, с намаляване на стойността, тъй като метаболитният баланс на СН се подобри.
Средният резултат за 12-те пациенти е намалял от 12,6 ± 3,7 (SD) в началото на 7,69 ± 3,23 (SD) в края на болничното лечение, със значителна разлика (p
По време на периода, изискващ клинично лечение (високи или силно вариращи нива на глюкоза в кръвта, вариращи нужди от инсулин), промени в индекса на NAG на урината на бъбречната тубулна функция са наблюдавани в общо 27 проби. Относителният индекс на NAG варира от 0,37 до 4,45; стойността на това се измерва чрез тубулопатия nх. Фактор, по-голям от 1, показва тубулопатия, при която микро-албуминурия не е открита при пациенти. Средният индекс на NAG за 12 пациенти на изходно ниво е 2 ± 1,28 (SD) и 1,1 ± 0,56 (SD) при изписване, което предполага подобрена бъбречна тубулна функция (CH
Установено е, че корелационната корелация между относителния индекс на NAG на урината и линейната регресия на захарен диабет е r = 0,691, което е показано на фигура 3 (y = a +14, a = - bx, a = -.
Среща
През последните две десетилетия стана известно, че активността без NAG в серума и урината може да бъде диагностична стойност при захарен диабет. Индексът на NAG в урината корелира по-дълго с метаболитния статус на СН (HbA1C) (15,16,17), микроалбуминуриум Я-2 и микроалбуминурия се измерва, но нарастването на индекса NAG е много по-рано (18,19). Многобройни доклади (6,10,11,12,13) и предишните ни данни (9) също показват, че индексът на NAG на урината е характерен параметър за ранния стадий на диабетната нефропатия. Дори тогава и в бъдеще, той показва тясна корелация със състоянието на метаболизма на СН, което се потвърждава от горното ни проучване. Подобно на нашите резултати, през последните години NAG индексът се счита за характеристика на метаболизма на СН и ранен параметър на някои тубулни дисфункции, които могат да се увеличат при пациенти с ежедневни признаци на диабет (20). За по-точна характеристика на промяната на състоянието на пациента, можем да сравним следващите индекси на NAG с първите индивидуални стойности. Това дава (1-2 години) диагностична информация за състоянието на бъбреците по-рано, отколкото при класическото изследване на микро-албуминурия.
Опитът през последните 10 години показва, че при пациенти с "трудно регулируем" метаболитен баланс на СН, трайно или значително увеличение на индекса на NAG в урината е първият предупредителен знак не само за тубулопатия, обикновено поради микро-албуминурия. При работещ пациент това може да е признак на по-строг хранителен контрол и строг метаболитен мониторинг при обратима тубулопатия. Наблюдението на тези параметри ще помогне да се предотврати развитието на бъбречна недостатъчност, което има голямо влияние върху качеството на живот на пациентите с диабет.
Бихме искали да благодарим на Tiborné Molnbr, асистент по секция, за съдействието.
Литература
Viberti GC, Hill RD, Jarrett RJ, et al. Микроалбуминурия като предиктор за клинична нефропатия при инсулинозависим захарен диабет Лансет 1982; Аз: 1430-1432
Cheung CK, Cockram CS, Yeung VTF, et al. Екскреция на трансферин с урина от неинсулинозависими диабетици: маркер за ранни усложнения? Clin Chem 1989; 35: 1672-1674
Martin P, Walton C, Chapman C, et al.: Повишена екскреция на трансферин в урината при деца със захарен диабет тип I Диабетна медицина 1990; 7: 35-40
Feldman D, Flandrois C, Jardel A, et al.: Циркадни вариации и референтни интервали за някои ензими в урината на здрави деца Clin Chem 1989; 35: 864-867
Price RG, Whiting PH: Уринарни ензими и нефротоксичност при хора Уринарни ензими, Jung K., Mattheiner H., Burchardt U. (Eds) Springer-Verlag. Берлин, Хайделберг, 1992; 203-221.
Watts GF, Vlitos MAJ, Morris RW, et al.: Екскреция на N-ацетил-Я-Dглюкозаминидаза в урината при инсулинозависим захарен диабет: връзка с микроалбуминурия, ретинопатия и гликемичен контрол Diab и Metab 1988; 14: 653-658.
Horak E, Hopfer S, Sunderman FW. Спекрофотометричен анализ за активност на N-ацетил-Я-D-глюкозаминидаза в урината Clin Chem 1981; 27: 1180-1185.
Oláh VA, Csáthy L, Varga J, et al.: Референтни граници за индекси на NAG в урината при деца, определени с три колориметрични метода Annals Clin Biochem 1994; 31: 87-88
Olbh VA, Ambrу L, Csбthy L, et al.: Активност на глюкозаминидаза на N-ацетил-Я-D в урината при деца с диабет Acta Paed Hung 1993; 33: 299-308
Минаками Х.: Клинична оценка на N-ацетил-Я-D-глюкозаминидаза при прогнозиране на диабетна нефропатия Хокайдо-Игаку-Заши 1992; 67: 234-246
Agardh CD, Agardh E, Isakson A, et al.: Асоциация между пикочната N-ацетил-Я-D-глюкозаминидаза и нейните изоензимни модели и микроангиопатия при захарен диабет тип I Clin Chem 1991; 37: 1696-1699
Цена RG. Ролята на NAG N-ацетил-Я-D-глюкозаминидаза в диагностиката на бъбречно заболяване, включително мониторинг на нефротоксичността Clin Nephrol 1992; 38: 14-19
Miltйnyi M, Körner A, Tulassay T, et al. Тръбна дисфункция при захарен диабет тип I Arch Dis Child 1985; 60: 929-931
Bonsnes RW, Taussky HH. На колориметричното определяне на креатинин от Jaffe реагира
ти J Biochem 1954; 158: 581-589
Klujber L, Molnbr D, Kardos M, et al.: Метаболитен контрол, гликозилиран хемоглобин и липопротеинов холестерол с висока плътност при деца с диабет Eur J Педиатър 1979; 132: 289-297
Shimojo N, Kitahashi S, Naka K, et al.: Сравнение на активността на N-ацетил-Я-D-глюкозаминидаза и аланин аминопептидаза за оценка на микроангиопатия при захарен диабет Метаболизъм 1987; 36/3: 277-280
Caliskan S, Ficicioglu C, Hacibekiroglu M, et al.: Тръбни маркери при деца с инсулинозависим захарен диабет Turk J Pediatr 1997; 39/2: 213-218
Платонова LV, Rabinovich SE, Shono NL, et al.: Уринарни ензими при инсулинозависим захарен диабет Вопр Мед Чим 1996; 42/1: 70-76
Maisam A, Sitzmann FC, Strohleim S.: N-ацетил-Я-D-глюкозаминидаза (3-NAG) в урината: параметър за ранно откриване на диабетогенна нефропатия в детска възраст Педиатър Paedol 1993; 28/3: 77-80
Hsiao PH, et al.: Активност на N-ацетил-Я-Dглюкозаминидаза в урината при деца с инсулинозависим захарен диабет Am J Nephrol 1996; 16/4: 300-303
* Levйlcнm: д-р В. Олбх Анна
DOTE Детска клиника
H-4012 Дебрецен, Pf.: 32