Съвременни изисквания за диагностика на генитален папилома вирус количествен подход

Отново книга за атопията и екзематозните разстройства!

съвременни

Направете нов тест, ако все още нямате тази книга!

Съдържание

Дерматология в Русия

  • Сайтът е регистриран като медия, електронно периодично издание на руски и английски, ISSN 2077-3544

Съвременни изисквания за диагностика на генитална папилома вирусна инфекция: количествен подход

Съвременни изисквания за диагностика на генитална папилома вирусна инфекция: количествен подход

Куевда Д.А., Шипулина О.Ю., Минкина Г.Н., Пиксасова О.

FGUN "Централен изследователски институт по епидемиология" Rospotrebnadzor, Московски държавен медицински университет, Москва, LLC "InterLabService"

Цел: разработване на метод за количествено определяне на широк спектър от HPV генотипове с висок онкогенен риск (12 вида) и оценка на неговите клинични характеристики при скринингови условия.

Материали и методи: Полимеразна верижна реакция в реално време се използва като метод за идентифициране и количествено определяне на HPV ДНК. Тестовата система „HPV VKR Screen-Titer FRT“, разработена за тази цел, използва принципа на усилване с разцепването на 5'-края на етикета на специфична сонда (TaqMan Assay) и принципа на специфичните за групата олигонуклеотиди, способни да усилват ДНК фрагменти от няколко представители на филогенетичната група. Количественото определяне се основава на използването на стандартни проби с известна концентрация на HPV ДНК и човешка ДНК. Резултатът се изчислява в геномни еквиваленти на вируса (G.E.), нормализирани до 10 ^ 5 човешки генома. Нормализирането на броя на геномите дава възможност да се неутрализира ефектът от вариациите в събирането на клиничен материал. Прагът за съответното количество вирус се приема за 10 ^ 3 g. върху 10 ^ 5 човешки генома, което приблизително съответства (при използване на предложения метод за вземане на проби (цервикалната цитологична сонда се поставя в 600 μl транспортна среда и се съхранява до доставката в лабораторията), методът на екстракция на ДНК (DNA-Sorb- AM и DNA-Sorb-D, FGUN TsNIIE) прагът от 1 pg/ml HPV DNA, описан от Snijders и Lorincz. Количествената оценка е извършена върху 99 проби, характеризиращи се с течна цитология и хистология като H-SIL или рак на маточната шийка и 305 проби, характеризирани като нормални или реактивни промени.