Пречистване на моноклонални антитела SpringerLink
Обобщение
Имуноглобулинът от серума на мишката, носеща асцит, която е попаднала в туморния асцит, може да симулира реактивност на mAb с антиген, срещу който мишката е била имунизирана по естествен път. На практика това е от особено значение, когато mAb присъства в асцитната течност в ниска концентрация или има само нисък афинитет към своя антиген и следователно не може да се използва във високи разреждания. Като контрол в такива случаи може да се използва серумна проба от мишка, получена преди инжектирането на хибридомните клетки.
В случай на директно маркиране (например с биотин, пероксидаза или флуорохром) на недостатъчно чист препарат на mAb, други протеини (напр. Инсулин или трансферин и др.) Също могат да бъдат маркирани. Ако антитялото вече се използва, напр. За да се изследват клетките за експресия на антигена, разпознат от моноклоналното антитяло, клетките, които носят рецептори за замърсяващ протеин (например трансферинови рецептори), също могат да бъдат маркирани.
Особени трудности възникват при използването на препарата на mAbs в биологични тестови системи. Очакваната активност на антитялото може да бъде променена чрез замърсяване на имунните медиатори. Тъй като много от тези имунни медиатори все още не са достатъчно добре дефинирани, не може да се изключи, че те все още присъстват в препарата дори след внимателно пречистване на антитялото. В такива случаи антитяло от същия имуноглобулинов подклас, което не реагира с въпросния антиген, но произхожда от същото сливане и е приготвено и пречистено при същите условия, може да служи като контролно антитяло.