OAB кръвна група (Бет Винсент, Симонин); Централна военна спешна университетска болница Др
OAB кръвна група (Бет Винсент, Симонин)
Главна информация
При хората са идентифицирани 26 системи от кръвни групи с 228 антигена; кръвната група се състои от един или повече антигени, управлявани от един ген или комплекс от два или повече тясно свързани гена.
Идентифицирани са и други антигени, които не са определени за установени системи. Еритроцитните антигени могат да бъдат протеини, гликопротеини или гликолипиди. Повечето се синтезират от еритроцитите, но някои антигени, като тези, принадлежащи към системата на Луис, се адсорбират от плазмата върху мембраната на еритроцитите. Някои антигени са специфични за еритроцитите, докато други се намират в други клетки в тялото. Познаването на кръвните групи е от съществено значение за трансфузионната терапия. По този начин лица, които нямат определени еритроцитни антигени, могат да произвеждат алоантитела, когато са изложени на кръв, съдържаща тези антигени при кръвопреливане или по време на бременност. Антителата, които взаимодействат с еритроцитните антигени, предизвикват незабавни или забавени реакции на хемолитична трансфузия и хемолитична болест на новороденото.
Системата на кръвните групи ABO е най-важната система на кръвните групи, защото: когато антигените не се експресират на повърхността на еритроцитите, съответните антитела винаги присъстват в плазмата, като стимулите за производството на антитела са представени от различни фактори на околната среда, като например бактерии (например Е. coli), които експресират на повърхността структури, почти идентични с ABO въглехидратите; образуваните антитела представляват смес от IgM (предимно) и IgG, активни при 37 ° C и способни да активират комплемента, а високата плътност на антигенните места върху мембраната на еритроцитите позволява свързването на голям брой антитела, водещи в случай на несъвместимо кръвопреливане в системата ABO, при остри хемолитични трансфузионни реакции.
Всички имунокомпетентни индивиди произвеждат естествени антитела (изоагглутинини или изохемолизини) към липсващите антигени на ABO (H) групата. Анти-А и анти-В обикновено се откриват 3-6 месеца след раждането, а на 5-годишна възраст титърът на антителата достига своя максимум и се поддържа през цялата зряла възраст. Титърът на IgM антителата може постепенно да намалява с напреднала възраст. Анти-А и анти-В антитела присъстват и при тези със слаби А или В варианти. Новородените обикновено нямат значително количество анти-А и анти-В в плазмата, с изключение на родените от алоимунизирани майки, при които може да присъстват IgG антитела от майката, които са преминали през плацентата. ABO антителата не са основна причина за хемолитична болест при новороденото поради инхибиране на антитела към разтворими А и/или В вещества, присъстващи в кръвта, както и А или В антигени, присъстващи в клетки, различни от еритроцитите; също така, афинитетът на свързване на антителата със захарните молекули е по-слаб от този на антителата към протеиновите молекули, като D4 антигена. Хемолизата е по-вероятна, ако майката е от група O, с детската група A2.
Препоръки за определяне на кръвна група ABO2
• преди кръвопреливане;
• преди инвазивна или хирургична процедура, потенциално свързана с усложнения от кървене, които могат да изискват трансфузия;
• предродилен и постнатален имунохематологичен мониторинг на майката и детето;
• на кръводарители;
• за ABO групова съвместимост при бъбречна и сърдечна трансплантация.
прибиране на реколтата
Обучение на пациента - не се изисква предварително обучение; полезна е информация за инфузионни лечения с макромолекулни разтвори, извършени преди определянето, трансфузии през последните 120 дни, инфекциозни заболявания с грам-отрицателни микроби със/без сепсис, злокачествени заболявания (карцином, лимфом, миелом).
Събран образец - а) капилярна кръв от пулпата на пръста; б) ще дойде кръв.
Контейнер за прибиране на реколтата - б) вакуутан без добавки или активиращ гел (червена или безцветна капачка).
Количество реколта - б) колкото вакуумът позволява.
Причини за отхвърляне на доказателствата - силно хемолизиран образец.
Тествайте стабилността - тестът се извършва незабавно, ако това не е възможно, пробата се държи 48 часа при 2-8 ° C.
Необходима е обработка след прибиране на реколтата - след пълна коагулация при стайна температура серумът и съсирекът се отстраняват. От останалите червени кръвни клетки се приготвя 10% суспензия в собствена плазма или във физиологичен разтвор. За метода на аглутинация върху картите се приготвя суспензия от 5% червени кръвни клетки в специална суспензионна среда.
Метод
Метод за определяне - в лаборатории Synevo се извършва директен/глобуларен метод (Beth-Vincent) за определяне на ABO кръвна група с помощта на анти-А, анти-В и анти-АВ серуми, със следните варианти:
- хемаглутинация върху плочата3. Използват се два контрола: контролен AB (червени кръвни клетки на пациента със AB серум) и автомобилен контрол (червени кръвни клетки и собствен серум).
- аглутинация и гел-филтрация върху микротръбични карти, съдържащи гел, импрегниран със специфичния реагент на еритроцитния антиген, който трябва да се определи (миши или човешки моноклонални антитела) - директен тест за ABO групиране и определяне на Ag RH1 (D) и Ag RH 1 2.3 (DCE).
Граници и смущения
Резултатът от определянето на кръвната група трябва да бъде прочетен от двама души и в крайна сметка трябва да бъде потвърден на втора кръвна проба.
За метода на аглутинация на карти положителната реакция се потвърждава само ако контролната микротръба е отрицателна. Положителната реакция се оценява в зависимост от размера на аглутинатите от + до ++++.
Грешки при четене поради технически грешки:
- мръсни стъклария; бактериално замърсяване;
- наличие на микротагове (фалшива аглутинация);
- не се наблюдава: пропорции на червените кръвни клетки/серум, ред на капване на серуми за кръвен тест (противоречива аглутинация), време за четене - късно четене: сухи ръбове (фалшива аглутинация), ранно четене (липса на аглутинация или лоша аглутинация).
Грешки поради червените кръвни клетки
Фалшиви аглутинатори
а) Наличието на ролки (псевдоаглутинация): използване на макромолекулни разтвори (Dextran, HES), нарушения на коагулацията, непълно коагулирани кръвни проби, хиперфибриногенемия, продукти от разграждането на фибрина, фибринолитични агенти, диспротеинемия, парапротеинемия, криоглобулинемия, повишено кръвно налягане, високи нива на хепарин, протамин сулфат), ревматоидни фактори, повишен холестерол, билирубин, левкоцитоза, левкоцитни ензими2. Контролът АВ е положителен; измиването на еритроцитите позволява правилното представяне на глобуларната проба.
б) Самоаглутинация
• Наличието на студени аглутинини (светлината на автомобила е положителна). Кръвната проба и реагентите се предварително инкубират при 37 ° С и тестът се извършва горещ.
• Червени кръвни клетки, покрити с алоантитела: новородено от несъвместима бременност (в Rh система, ABO),
пациент, прелян с несъвместима кръв.
• Определяне на кръвна група върху кръв, събрана от пъпната връв: желатинът Wharton, макромолекулното вещество, което заобикаля еритроцитите, придава вид на псевдоаглутинати. За да го премахнете, е необходимо да измиете еритроцитите поне 6 пъти, преди да определите.
• Наличие на лекарствени имунни комплекси.
в) Полиглутинация
При септицемии с грам-отрицателни бацили криптоантигените (Т) са изложени на ензимното действие на бактериални агенти, разпознати от антитела (анти-Т), присъстващи в повечето човешки серуми2. Свидетелят А. Б. е положителен.
Липсваща или слаба аглутинация или поява на двойна популация: аглутинацията не е пълна, с наличие на свободни червени кръвни клетки (аглутинатите се появяват на розов фон):
• стара кръв;
• слаби антигени: новородени, недоносени;
• слаби подгрупи A или B;
• затихване на антигените (при левкемии, лимфоми, болест на Ходжкин);
• пациент с група А или В, прелят с кръв от група О, кръвоизлив на майката и плода;
• наличие на голямо количество вещество А или В в плазмата (рак на стомаха, панкреаса), което неутрализира изследваните антитела (червените кръвни клетки трябва да се измият, за да се отстранят);
• наличие на химера или мозайка (изключителни, например: постмедуларен алографт).