Нинхидринов реактив - Технически речник том VII
Реагентът нинхидрин лесно се окислява и потъмнява при излагане на светлина и въздух. Трябва да се съхранява на студено, тъмно и под азот. Дори и най-късите тръби за подаване на реагент трябва да бъдат защитени от дифузия на въздуха през стените им със специално покритие. Към реагента понякога се добавя калаев хлорид за намаляване на нинхидрина. От него в тръбите постепенно се натрупват неразтворими утайки.
Приготвяне на реагент за нинхидрин: 375 ml етилен гликол монометилов етер (TU 6 - 09 - 08 - 4398 - 77) се поставят в съд от оранжево стъкло с вместимост 1 литър, 125 ml натриев ацетат буферен разтвор рН 5 5 се добавят, азотът се пропуска при разбъркване на магнитна бъркалка в продължение на 10 минути, след това се добавят 10 g нинхидрин и азотът отново се подава в продължение на 10 минути, докато разбъркването на магнитна бъркалка продължава, докато нинхидринът се разтвори напълно. След това се добавят 0,19 g 2-воден калаев дихлорид и се разбърква.
Приготвяне на нинхидринов реагент: 40 mg SnQ2 2H2O се разтварят в 25 ml цитратен буферен разтвор и се добавят 40 mg нинхидрин, предварително разтворен в 12 5 mp метилцелозолв.
Разработката се извършва с нинхидринов реагент. След това стъклената плоча с адсорбента се загрява в пещ за 30 минути при 110 ° С.
Хроматограмата на амина е показана с нинхидринов реагент и след овлажняване с нинхидрин хартията трябва да се нагрее за 5 минути при 105 ° С, за да се получи интензивен виолетов цвят.
Схематична диаграма на нинхидринов анализатор, направен от автоанализатор от Technicon Chromatography Co. След това към пробата се добавя реагент с нинхидрин, подобен по състав на описания на страница.
За определяне на пролин се приготвя нинхидринов реагент, съдържащ 40 ml 6 М Н3Р04, 60 ml ледена оцетна киселина и 2 5 g нинхидрин на всеки 100 ml от сместа. За да се разтвори нинхидрин, тази смес се нагрява до 70 на водна баня.
Схематична диаграма на нинхидринов анализатор, направен от автоанализатор от Technicon Chromatography Co. След това към пробата се добавя реагент с нинхидрин, подобен по състав на описания на страница.
Последната трудност беше преодоляна чрез използване на нинхидринов реагент, съдържащ калаен хлорид. Важна характеристика на автоматичния апарат е изключително постоянен фон: 0 001 единици оптична плътност преди и след всеки пик. Задоволителни резултати могат да бъдат получени от 1/10 μmol разтворено вещество; поради отличната възпроизводимост на обемите на потока е възможно да се идентифицират компонентите на сместа, присъстващи в ниски концентрации.
Използване на тънкослойна хроматография за проверка на препаративното разделяне на колони (С любезното съдействие на Am. Chem. Soc . Малки количества аминокиселини, прехвърлени в нея, се елуират с нинхидрин реагент. Разделените зони се анализират допълнително чрез TLC.
Росен [16] подобри метода на Пай и Морис [30], като направи някои промени в състава на нинхидриновия реагент, позволявайки да се получат по-стабилни резултати и също опростявайки метода.
Действителната граница на откриване е по-ниска и зависи до известна степен от условията на сушене след прилагане на нинхидриновия реагент.
Ако е необходимо, пробата (0,5 ml) се разрежда с буфер до 2 ml и се смесва с 2 ml нинхидринов реагент.
Петри; 7) NaHCO3; 8) 5% PbNO3 или Pb (CH3COO) 2; 9) реактив на Салковски; 10) реактив на Ерлих; 11) нинхидринов реагент; 12) реактив на Неслер; 13) хумусна почва; 14) пресни листа от лупина или сухи листа от други бобови растения; 15) рибно брашно, месно брашно или парчета месо, риба.
Потопете разтвора за култивиране върху филтър или хроматографска хартия с помощта на микропипета с изваден нос (10-20 капки в една точка), изсушете го върху вентилатор, капнете реактива на Салковски, Ерлих или нинхидрин. Реактивът на Ерлих дава лилаво оцветяване с индолови производни.
Два метода за синтез на аминокиселини. Удобна цветна реакция към аминокиселините е с нинхидрин (фиг. 12.5); реакционният продукт е силно конюгиран и следователно силно оцветен. Нинхидриновият реагент се използва за откриване на аминокиселинни петна в хроматография на плоча или хартия и за колориметрично количествено определяне на аминокиселини.