МОРФОЛОГИЧНО ИЗСЛЕДВАНЕ НА КРЪВНИЯ ПЛОД Medlife
Морфологичното изследване на оцветената кървава цитонамазка May Grunwald Giemsa оценява:

• еритроцити: аномалии в размера, формата, структурата, включванията на еритроцитите, съдържанието на хемоглобин;
• левкоцити: структурни аномалии, наличие на включвания, наличие на атипични, незрели форми;
• тромбоцити: аномалии в размера, формата, структурата, разположението на цитонамазката.
Изследването на кръвната намазка се извършва по изрично искане на клинициста, както и при предупредителните съобщения от хемолевкограмата, извършена на автоматичния хематологичен анализатор (напр. Бласти, атипични лимфоцити, ляво отклонение, еритробласти и др.).
Морфологично изследване на еритроцитите
Морфологично нормалните еритроцити се появяват като: нормохромни, нормоцитни, двойно вдлъбнати с форма на диск, без включвания и ануклеирани. Редица аномалии на еритроцитите могат да бъдат открити чрез микроскопско изследване на кръвната цитонамазка, както следва [2,11]:
Морфологична аномалия
Патофизиология
Свързани заболявания
Тежка анемия (напр. Дефицит на желязо, хемолитично и др.)
Еритроцити със спикули (неравномерни цитоплазмени удължения и плътен център)
Промяна на мембранния липиден слой
Абеталипопротеинемия, нарушен чернодробен паренхим, постспленектомия.
Кодоцити или червени кръвни клетки "на целта"
Червените кръвни клетки като знак за стрелба по мишена, хипохромни
Повишена излишък на клетъчната мембрана
Чернодробно заболяване, таласемия, постпленектомия, хемоглобин С
Елиптичната форма на еритроцита
Ненормални цитоскелетни протеини
Ехиноцити или кренирани червени кръвни клетки
Еритроцити с къси удължения/шипове, с централна бледност
Промяна на мембранните липиди
Те обикновено са артефакти. Редки: уремия, стомашен карцином, дефицит на пируват киназа.
Бледост на централните еритроцити
Намален синтез на хемоглобин
Желязодефицитна анемия, сидеробластика, таласемия
Включения: Тела на Хауъл-Джоли
Включенията обикновено са уникални, малки, кръгли, базофилни
Постпленектомия, мегалобластна анемия, хемолитична анемия
Кръгови включвания (пръстен)
Постпленектомия, мегалобластна анемия, хемолитична анемия
Малки еритроцити, с диаметър 8µm VEM> 100 fL
Млади еритроцити, нарушения на съзряването на еритроцитите
Мегалобластна анемия, алкохолизъм, чернодробни заболявания, хемолитична анемия (ретикулоцити), хипотиреоидизъм и др.
Еритроцити с диаметър> 9 µm, овални
Сиви или сини червени кръвни клетки
Рибозомен материал (млади червени кръвни клетки)
Утаяване на рибозомна РНК
Отравяне с олово, таласемия
Разположението на червените кръвни клетки е подобно на физиката на монетите
Агрегация на червените кръвни клетки от парапротеини
Парапротеинемия (миелом, макроглобулинемия на Waldenstrom)
Изкривени, фрагментирани червени кръвни клетки
Механични изкривявания в микроциркулацията (отлагания на фибрин, механични протези)
Микроангиопатична хемолитична анемия (CID - дисеминирана вътресъдова коагулация, PTT - тромботична тромбоцитопенична пурпура, клапна протеза, тежки изгаряния)
Сферични еритроцити, без централна бледност, с по-малък диаметър
Намалена мембранна повърхност
Наследствена сфероцитоза, имунна хемолитична анемия
Дефект на мембраната с необичайна катионна пропускливост
Наследствена стоматоцитоза, имунна хемолитична анемия
Молекулярна агрегация на хемоглобин S
Морфологично изследване на тромбоцитите
Оценява се морфологията на тромбоцитите и се оценява броят на тромбоцитите на намазка (полуколичествена оценка). Тромбоцитите са синьо-сини цитоплазмени фрагменти с фини азурофилни гранули, 2-4 µm в диаметър и различни форми (често сферични или елипсоидални). Очакваният брой тромбоцити на намазка е нормален, ако: тяхното присъствие е 5 - 15/поле на потапяне или 1 тромбоцит при 10-20 еритроцити. [11]
- Мегатбороцити (> 4 µm диаметър)
- Ускорено производство на тромбоцити
- Дефицит на говеждо месо B12
- Миелопролиферативни синдроми
- Вродена тромбоцитопения (синдром на Bernard-Soulier)
- Имунна тромбоцитопенична пурпура (ITP)
- Фрагменти от мегакариоцити
- миелофиброза
- Хипогрануларни тромбоцити
- Миелодиспластичен синдром
- миелофиброза
- Тромбоцити с причудливи форми, с грубо групирани груби гранули:
- Миелопролиферативни заболявания
- спленектомия
Морфологично изследване на левкоцити.
Най-често срещаните морфологични аномалии на левкоцитите са реактивни, индуцирани от инфекции или от токсичността на някои химикали (напр. Лекарства); по-рядко се наблюдават структурни промени, предизвикани от необичайно съзряване (напр. нуклео/цитоплазматична асинхрония) или вродени аномалии.
● Дегенеративни промени:
- Некротични/пикнотични клетки (проба над 4 часа; уремия; сепсис)
- Свободни ядра (хронична лимфоцитна левкемия, мехури с остра левкемия, артефакт)
● Барови тела - ядрен материал, прикрепен към ядрото, във формата на „барабанна пръчка“, която се появява само при жени (с доминираща Х хромозома)
● Хиперсегментирани неутрофили (> 5 дяла), свързани с:
- мегалобластна анемия/дефицит на фолиева киселина
- антифолатна химиотерапия (напр. метотрексат)
● Хипосегментирани неутрофили (2 дяла)
- Аномалия на Пелгер-Хует (наследствена)
- Неутрофили на псевдо-Пелгер (миелодиспластичен синдром)
● Хипогрануларни неутрофили: неутрофили, които експресират редки гранулации и/или отсъствие на интрацитоплазмени гранулации.
- свързано с миелодиспластичен синдром
● Аномалия на Alder-Reilly: големи, видни азурофилни и базофилни гранули, подобни на токсичните гранули (може да присъстват в лимфоцити и моноцити)
- наследствен, свързан с аномалии на костите и хрущялите
- при мукополизахаридоза
● Синдром на Chédiak-Higashi: еозинофилни включвания (гигантски лизозоми), присъстващи в: Левкоцити
- Наследствен: частичен очен и кожен албинизъм, податливост на бактериални инфекции и кръвна дискразия.
● Неутрофили с токсични гранули (устойчивост на първични гранули, често свързани с тела и вакуоли на Döhle)
- Тежки инфекции или увреждане на тъканите
- Лекарства, особено гранулоцитни растежни фактори
● Тела на Döhle (малки, сини/сиви, овални или неправилни цитоплазмени включвания)
- бактериални инфекции, скаралатин, изгаряния, травма, бременност, цитотоксични лекарства
- Големи тела на Döhle могат да се появят в наследствената аномалия на May-Hegglin.
● Интрацитоплазмени вакуоли (съдържат ензими с роля във фагоцитозата)
● Еритрофагоцитоза или бактериофагоцитоза - са явления, характерни за моноцитите или неутрофилите (и двете клетки имат IgG/C3 рецептори)
- гореща автоимунна хемолитична анемия
- дисеминиран лупус еритематозус
- сепсис
● Атипични/реактивни лимфоцити се появяват в отговор на различни вирусни или невирусни стимули
Морфологичен аспект: неправилна форма на цитоплазмата и/или ядрото, изобилна цитоплазма, базофил, интрацитоплазматични вакуоли, фин хроматинов модел, понякога с нуклеоларен модел (подобно на взривове)
- вирусни инфекции (Epstein-Barr, цитомегаловирус, вирусен хепатит)
- лекарствени реактиви или невирусни стимули (напр. токсоплазмоза)
● Плазмоцитните лимфоцити (тюркска клетка) са междинни форми на трансформация на В лимфоцита в плазмена клетка. Морфологичен аспект: ядрото е централно, леко ексцентрично, интензивно базофилната цитоплазма е по-рядко разпространена.
- се появява в периферната кръв след интензивна антигенна стимулация (напр. след ваксинация)
- при макроглобулинемия на Waldenstrom - като злокачествени клетки
● Тела Ръсел: розови, червени или безцветни включвания в цитоплазмата на плазмената клетка, участващи в производството на имуноглобулини (клетка на Мот)
- често срещан при множествен миелом
● Плазмоцит с цитоплазма „в пламък”: плазмена клетка с червена периферия на
- се среща при множествен миелом с IgA
● Клетка на Ридер: ядро с хамсия
- неходкинови левкемични лимфоми, някои остри левкемии
● Тела на Ауер: пурпурночервени включвания с овално-удължена форма, които се появяват само в цитоплазмата на миелоидни взриви; Телата на Auer се образуват чрез сливането на първични пероксидазо-положителни гранули.
- присъствието на телата на Auer предполага остра миелоидна левкемия
- Множество тела на Ауер се появяват при остра промиелоцитна левкемия
Периферна кръвна мазка се препоръчва с пълна кръвна картина !
- Оценка на морфологията на еритроцитите при анемии.
- Оценка на морфологията на тромбоцитите при тромбоцитопении
- Количествено определяне (%) и морфологично описание на взривовете
- Количествено определяне (%) и описание на атипични лимфоцити при синдроми на мононуклеоза
- Описание на структурните аномалии на левкоцитите, количествено определяне на лявото отклонение на левкоцитната формула, уточняване на видовете незрели гранулоцити.
- Артефакти, причинени от неправилна техника на разтягане на намазка
- Ненормално разпределение на левкоцитите, с разположение на големи левкоцити по краищата на цитонамазката и в ресни.
- Поради неправилен дисплей, левкоцитите по краищата може да изглеждат по-малки от нормалното .
- Механично унищожаване на клетките с наличие на свободни ядра върху цитонамазката, при липса на истинска крехкост на клетката (както при левкемии).
2. Артефакти, причинени от неправилна техника на оцветяване
- Клетките са прекалено оцветени в синьо: твърде дълго време на оцветяване, твърде алкален буфер (неправилно приготвен/стар), стари намазки или твърде дебели намазки.
- Областта между клетките е оцветена: неадекватно измиване на острието, възможна парапротеинемия.
- Оцветяването изглежда твърде розово/червено: буферът е твърде кисел, твърде кратко време на оцветяване/прекомерно измиване на острието 4; 5 .
3. Артефакти, причинени от продължително излагане на EDTA (стари проби)
- Артефакти на еритроцитите: кренирани червени кръвни клетки, "насочени" червени кръвни клетки, стоматоцити.
- Артефакти от тромбоцити: могат да изглеждат увеличени, по-малко оцветени и без характерните азурофилни гранули.
- Артефакти на левкоцити: цитоплазмени вакуолации/разкъсвания, ядрен кариорексис. Моноцитите се появяват с многобройни вакуоли и/или неправилно лопасти ядро.
- Реактивните лимфоцити продължават да се променят морфологично, когато влязат в контакт с EDTA, ядрото се извива и цитоплазмата се увеличава и/или вакуолизира (може да се обърка с клетките на лимфома).
- Ядрото на лимфоплазмоцитите може да стане извито/"с форма на детелина"