Холерен бактериофаг 7106 за приготвяне на диагностични препарати
Републики (11r 5 892 54
От 12 до 7/00 eordarvteein и комитет
Съвет на eiiiatreo на СССР Io Iolam Ieooreteii and Atirktiy (53) UDC 576.858 "9 (088.8) (72) Автори на обзора ms. Дрожевкина и. К. Александрова и (0. и. Арутюн в
pl) кандидат rostov-on-don държавен изследователски институт за борба с чумата (54) CHOLERNY BACTERIOPHAGUS 7106 ЗА ПОДГОТОВКА
Изобретението се отнася до медицината.
Холерният бактериофаг В е известен от колонията Ашешков (1). Има сравнително тесен спектър на действие и е активен главно върху 5 холерни вибриони от класическия биотип.
Новият холерен бактериофаг 7> 06, има висока специфичност и се различава от холерния бактериофаг В 10 с широк спектър на литична активност по отношение на холерните вибриони
Холерен бактериофаг 7106 изолиран) 5 през 1970 г. r sa изпражнения вибрационен носител (причинителят на холера El Tor). В резултат на последователна селекция на прозрачни отрицателни колонии върху твърда среда в комбинация с мулгенното действие на UV лъчите и пасажи в изолирана верига на тънките черва на морско свинче се получава стабилен вирулентен бактериофаг 7106.
Холерният бактериофаг 7106 за приготвяне на диагностични препарати се съхранява в колекцията на Държавния научноизследователски институт за борба с чумата в Ростов на Дон под номер 7106 и се характеризира със следното @ "
2 други морфологични и физиологични характеристики.
Морфологични особености ° Бактериофагът има многостранна глава, в шестоъгълна проекция, с размер
500 30x450 30A и процес с свиваща се обвивка 1010 30 A дълъг и 137 + 15 A. Според морфологията на частиците фаг 7106 принадлежи към групата y, според класификацията на A.S. Tikhonenko.
Физиологични подписва. Образуване на отрицателни колонии. Двуслоен агар на Мартен (рН 7,6), приготвен по метода Grazia с индикаторна култура на щама El Tor vibrio 75 M. След 18-24 часа инкубация при 37 ° С, фаговите колонии са прозрачни, правилна кръгла форма с ясно очертан гладък ръб, 0,5-1,5 мм.
Серологични свойства. Отнася се до Y серологичния тип холерни фаги според вътрешната "класификация.
Антигенни свойства. Когато се прилага на зайци, той предизвиква производството на специфични антитела срещу фаги от типа:, Антигенните свойства на бактериофага 7106 са стабилни. Титър на серума 1: 250, ea
5 минути неутрализира 1004 корпускули на биологичния фаг. Титър на бактриофаги
7106 според Grazia b 10, според Appelman
10 ". Продуцентите на бактериофага са специално подбрани нелизогенни щамове на El Tor nibrios. Оптимална множественост на инфекцията
0 05-0,5. Продължителността на един цикъл на развитие е 24 минути. Реколта € ”
60 корпускули на една микробна клетка., Специфичност ° Строго специфична.
Не лизира микробите от други видове.
Диапазон на литична активност в хомоложен микробен вид.
Бактериофагът има широк спектър от атитично действие върху вибрионите
Полезността на изобретенията се крие във факта, че с помощта на бактериофаг 7106, нов
Фагови препарати за диагностика и
Идентифициране на причинителя на съвременната холера El Tor.
П р и м е р 1. За приготвянето на диагностичен холерен фаг; използвайте фаг 7106 под формата на монофаг. За това фаг 7106 в количество от 4 мл се въвежда в бутилка с 200 мл бульон на Мартин (рН 7,6) и едновременно
2 ml 3-часова бульонна култура от холерни вибриони от биотипа щам El Tor
75 М. След 3 часа инкубация при 37 ° С, съдържанието на флакона се филтрира през филтър на Seitz с азбестова стерилизираща плака, за да се освободи от микробните клетки. Приготвеният препарат на фаг 7106 (филтрат) се проверява за специфична и неспецифична стерилност и активност по известни методи. Определете фаговия титър по метода на агаровите слоеве съгласно Grazia. За да се направи това, 0,2 ml 3-часов бульон се добавят към разтопения, охладен до 45 ° С и се изсипва в епруветки в полутечен агар; Noah култура на чувствителен щам на холерни вибриони. Към тази смес се добавят 1 ml фаг в разреждания 10 и 10>. Съдържанието на епруветката се смесва и се излива върху повърхността на 1,5 агар в чаша на Петри.
След като агарът се втвърди, съдовете се поставят в термостат при 37 ° С и след 12- @
Броят на отрицателните фагови колонии се взема под внимание за 18 часа. Титърът на диагностичния фаг трябва да бъде най-малко 106.
Полученият по този начин диагностичен фаг 7106 се използва за бързо определяне на Vibrio cholerae. Диагностичният фаг на холера се използва неразреден. За това, с пипета на Пастьор или платинена верига (5 mm в диаметър), капка @ цял Phage 7106 се нанася върху тревата, приготвена по двуслойния метод на 3-часова култура на изпитвания субект на щам заподозрян в холерни вибриони. След 6-12 часа инкубация при 37 ° С, резултатите се записват по следната схема: