Гъби, открити върху семената, съхранявани от пасинови пасища, и техните биологични дейности

Изолирахме 629 гъби от 1296 растителни семена, включително домати, патладжани, понички и червени чушки, запазени дългосрочно или краткосрочно. Те бяха класифицирани в 22 рода с изключение на неидентифицирани гъби и бяха разделени на 2 вида: домат-патладжан и групи чушки. Резултатите от клъстерните анализи с метода на непретеглените групови двойки и аритметичната средна стойност също подкрепят тези групи. Повечето доматени семена са заразени с Geotrichum candidum те покълнаха и израснаха като незаразени семена. Cladosporium sphaerospermum и Arthrinium sp. Изолираните от патладжаните семена силно потискат кълняемостта и Penicillium потиснато удължаване на семенния корен при патладжаните. Alternaria alternate, Botrytis cinerea и Myrethecium verrucaria открити от семена от червен пипер и понички са патогенни за плодове и разсад след изкуствено инокулиране.

Болните от семена болести могат много лесно да се разпространят отвъд международните граници и често са трудни за контролиране, тъй като са трудни за идентифициране, с типични симптоми, рядко срещани на повърхността на семената, с изключение на някои зеленчуци. Тъй като икономическото въздействие на болестите, предавани от семена, се увеличава през последните години, тяхното значение се увеличава при много видове култури в Япония, както и по света. Изследванията върху патологичните семена са фокусирани главно върху зърнените култури, докато няколко проучвания са проведени върху зеленчуци и декоративни цветя. В Япония проучванията разглеждат само патогени, които причиняват сериозни увреждания или са лесно присъстващи заедно с естествено заразени семена, като Fusarium. което причинява увяхване и ъглово оцветяване на тиквички през 1970 г., черни петна, причинени от Alternaria spp. върху кръстоцветните в началото на 90-те и динята. Трябва да се предприемат систематични изследвания върху патогени.

Японското министерство на земеделието, горите и рибарството (MAFF) стартира проект за генна банка през 1985 г. за събиране на семена като генетичен ресурс. Ние обаче имаме малко информация за семена от банката на събраните семенни гени и само за Alternaria dauci и Alternaria корен от семена от моркови са докладвани от семена от колекции досега (1993). Тяхната патогенност и въздействие върху качеството на семената, включително степента на покълване, остават неизвестни. Следователно, поредица от проучвания на семена са свързани с 5904 семена от зеленчуци, които се поддържат в колекцията от семена в генната банка през 2000 г. Този доклад е част от тази поредица от изследвания.

Охата описа терминологията, свързана със семената, на японски. Неговата дефиниция за семена е ограничена до употреба, но семената обикновено включват растителни патогени, непатогенни ендофити. Ние вярваме, че качеството на здравите семена трябва да се обсъжда от гледна точка на цялата гъбична флора на гъбата, която нахлува във вътрешната тъкан на семето, но също така и върху повърхността на семето. По този начин, всички гъби, свързани със семена, са обсъдени в това проучване.

В този доклад са изследвани семената на доматите, патладжаните, поничките и червените чушки. Всички семена, използвани в това проучване, се съхраняват като колекции от семена в генната банка, предложена от MAFF в Япония. Никой не е бил химически третиран и никой няма изразени симптоми на повърхността си. Използвани са 2-3 сорта за всеки вид и 2 отделни партиди, събрани през различни години за всеки сорт. Партидите от всеки сорт представляват семена, събрани през 1980-те (стари) и 1990-те (нови). За партиди семена от червен пипер, събрани през 1991 и 1999 г., се прави препратка към стари и нови. Характеристиките на посадъчния материал, използван в това проучване, като покълване, срок на годност и произход на посадъчния материал са дадени в таблица 1.

Откриване и изолиране на гъбички по семената

За откриване на гъбички е използван частично модифициран метод на агарна плоча с картофена декстроза, съдържаща 0,005% хлорамфеникол (PDA). Половината от семената от всяка партида се измиват под течаща вода в продължение на 2 часа и след това се сушат върху стерилизирана филтърна хартия; другата половина от семената останаха немити. Всички операции от разпечатване на пакетите със семена до поставяне на семената в PDA плоскости се извършват в стерилна камера. За всяка партида се приготвят 12 плаки, всяка съдържаща 6 измити или немити семена. Следователно бяха изследвани 72 семена за всяка партида и за всеки сорт бяха проведени 4 изследвания. Плаките се инкубират при около 10 ° С за потискане на мицелния растеж на бързо растящи гъбички. След един месец инкубация, спорите и колониите на гъбичките, които се появиха около семената, бяха изолирани от една спора за допълнително идентифициране. Броят на изолираните щамове беше преброен и изчислен процентът на семена от гъби. Когато в едно семе бяха открити повече от една колония от гъбен вид, аз го считах за изолиран щам.

Обикновено Sedborne се влияе от много фактори като модели на формиране на семена и околната среда по време на производството на семена. За да се анализират тези фактори, сходството между гъбичната флора, получена от семена от различни среди, беше проверено чрез клъстерния анализ на Евклид. Щамовете, изолирани от 22 гъбични рода, открити от един сорт, са подредени по математическа прогресия; всяка прогресия се състои от 22 елемента, като се приеме, че 22-те гъбични рода са били открити при всички сортове. Изчислено е евклидовото разстояние между прогресиите на сортовете. Резултатите са картографирани като дендрограма, като се използва методът на непретегляне на групи със средна аритметична стойност, базирана на разстоянието.

За да се определи патогенността на изолираните щамове, плодовете на доматите, патладжаните, поничките и червените чушки (неизвестни сортове) се навиват с ужилвания от игла и след това се инокулират с мицелиален диск (с размера на корк) на всеки вид, отглеждан върху плочи. на PDA. За инокулация с Rhizopus stolonifer на чушки, чушките се поставят в суспензия от спори от PDA културата. Инокулираните плодове се държат в достатъчно влажна пластмаса (приблизително 100% от относителната влажност) при стайна температура. Ефектите на изолирани щамове върху кълняемостта на семената и растежа на растенията бяха изследвани след изкуствено инокулиране, повърхностно стерилизирани семена със спори и/или мицел от PDA или V8 агар култури.

Семената от всеки сорт, съхранявани за кратко и очевидно здрави поради висока кълняемост (табл. 1), се дезинфекцират с 1% NaClO за 5 минути и 70% етанол за 3 минути. След измиване с дестилирана вода, семената се изсушават в стерилна камера, накисват се в една от клетките, инокулирани за 10 минути, изсушават се отново и се съхраняват при температура около 10 ° С за един месец. След съхранение семената се инкубират върху плочи с воден агар при 20 ° С. Кълняемостта беше тествана след една седмица и дължината на семенния корен беше измерена на 2 седмици. Разликите в дължината на семенния корен са статистически оценени чрез теста на Student на P Results

Честота на гъбични видове, изолирани от семена

Приликите между семенната гъбична флора

Клъстерните анализи на приликите между гъбичната флора върху семената показват, че те могат да бъдат класифицирани в класове, корелирани с растителни видове, независимо от годините на реколтата и местонахождението.

Гъбичната флора върху семената от сортове пасхар се отдели от флорната група върху репичките и образува уникален клас, въпреки че класът включва и краставичната флора cv. Йомакирсшу

Освен това класът на плодовете, с изключение на CV на доматите. Вкусно, беше разделено на два подкласа, а именно домати от патладжани и подклас пипер.

Патогенност на изолатите

Всички изолати на A. alternata и Phoma spp. Идентифицирани от семена от домати са непатогенни за плодовете от домати, но Geotrichum candidum е мощен патоген срещу рани от плодове на домати. Изолати, представени от Cladosporium spp., A. заместник, Fusarium verticillioides, Phoma sp.,и Rhizosphaera sp, открити от семена на патладжан са непатогенни.

Alternaria alternta, М. веррукария и Fusarium spp Доказано е, че изолираните от чушки са патогенни за плодовете от пипер.

Ефектите на изолатите върху кълняемостта на семената и растежа на растенията

Всички тестове за гъбични изолати, открити от семена на домати, практически не са имали ефект върху кълняемостта на семената.

Изолати на A. alternata, Penicillium waksmanii и Arthrinium sp. силно инхибира удължаването на семенния корен и след това причинява гниене на разсад 3 дни след покълването

Arthrinium sp и C.sphaerospermum идентифицирани в семената на патладжан силно инхибира кълняемостта на семената.

Изолирайте променливите на Penicillium силно потиснато удължаване на корена, докато изолатите на C. oxysporum, Rhizopus stolonifer и Aspergillus paradoxus те леко потискат удължаването на корена.

Редуващи се стъбла се редуват открити от семена на пипер са патогенни за поничките и чушките, те потискат удължаването на семенния корен, докато B.cinerea и M.verrucaria те силно потискат удължаването на семенния корен при чушките, но ефектът върху кълняемостта е незначителен.

За разлика от него, Ulocladium atrum от време на време засилва удължаването на корена при чушките.