Диизопропил флуорофосфат - голяма енциклопедия на нефт и газ, статия, страница 2
Диизопропил флуорофосфат
В САЩ и Великобритания изследването на органични производни на фосфорните киселини с цел намиране на съединения с висока концентрация сред тях започва през 1939 г. В резултат на това диизопропил флуорофосфат (DFP) е избран като потенциален ОМ, за който е разработена технология на индустриалното производство и са проведени полеви експерименти. На тях беше възложено разработването на технология зарин за САЩ, като се вземе предвид опитът на експлоатационните инсталации за производство на органичен фосфор в Германия. [16]
Диизопропил - (P32) фосфорил ензим се приготвя от активен ензим (25 mg), разтворен в 5 ml 0 1 M фосфатен буфер рН 8 0 и 0 63 ml 0 02 M разтвор на диизопропил флуорофосфат (P32) (съдържащ от 1 до 30 μC от P32 на 1 mg) в изопропилов алкохол. [17]
Ефективността на алифатните алкохоли с права верига (до хексанол) като инхибитори се увеличава с дължината на веригата; инхибиторният капацитет намалява с увеличаване на разклоняването на веригата. Диизопропил флуорофосфатът не е ензимен инхибитор. [18]
Функционалните групи на активния център на химотрипсина са идентифицирани с помощта на необратими инхибитори. Остатъкът Ser-195 е модифициран с диизопропил флуорофосфат и фенил-метилсулфофлуорид, а остатъкът His-57 - r4 - тозил - b - фенилал-нил-хлорометил кетон (вж. Фиг. 89 и стр. Двуетапният процес на хидролиза на химотрипсин е установено при изучаване на кинетиката на хидролизата нитрофенилацетат. [19]
О, и не реагира с молекули, имащи групата P. S. Освен това експерименти с диизопропил флуорофосфат, съдържащ белязан фосфор, показват [76], че (C2H6O) 2PO групата е свързана с ензима, докато флуорният йон преминава в разтвор; очевидно електрофилната атака на ензима продължава. Ако обаче ацетилхолип-ензимният комплекс се образува по същия начин, тогава въглеродният край на СО групата вероятно е свързан с ензима. Липсата на реакция с CS се дължи на факта, че въглеродът тук не е достатъчно положителен; известно потвърждение на това предположение е влиянието на други заместители върху разглеждания въглероден атом. [20]
Впечатлението беше, че появата на определена аминокиселина в края на молекулата на химотрипсина я прави активна. Скоро стана ясно, че добавянето на молекула диизопропил флуорофосфат (DFP) към химотрипсина го лишава от неговите ензимни свойства. Може да се приеме, че DPP се свързва с някаква ключова аминокиселина, която определя ензимната активност на химотрипсина. [21]
Получаването на карбоксипептидаза от панкреаса е относително трудоемка процедура. Когато се използват търговски лекарства, ензимът обикновено се третира с диизопропил флуорофосфат: (DPP), за да се потисне активността на следи от химотрипсин, трипсин и субтилизин. [23]