Библиографска информация от немската библиотека - PDF безплатно изтегляне
2 Библиографска информация от Deutsche Bibliothek Deutsche Bibliothek изброява тази публикация в Deutsche Nationalbibliografie; Подробни библиографски данни са на разположение в Интернет на адрес. 1-во издание от издател: Deutsche Veterinärmedizinische Gesellschaft Service GmbH, Gießen Отпечатано в Германия ISBN Издател: DVG Service GmbH Frankfurter Straße Gießen 0641 /
3 От Института за експериментална анестезиология към Центъра по анестезиология и реанимация на Университета Йохан Волфганг Гьоте във Франкфурт на Майн Ръководител: проф. Д-р. H. Förster Изпратено от Института по биохимия и ендокринология на университета Justus Liebig Giessen в катедрата, представена от: проф. Д-р. W. Schoner Молекулярно разпределение на масата на хидроксиетил нишестето (HES), съхранявано в далака и черния дроб при плъхове след интравенозно приложение Полимерни аналитични изследвания чрез свързване на изключващата хроматография и многоъгълно лазерно разсейване на светлината INAUGURAL DISSERTATION за получаване на докторска степен в отдела по ветеринарна медицина на университета Justus Liebig Gießen Изпратено от MARGIT WAGENBLAST ветеринарен лекар от Aalen Gießen 2004
4 С одобрението на Катедрата по ветеринарна медицина на Университета Justus Liebig Gießen Декан: проф. Д-р. Д-р h.c. Б. Хофман 1-ви докладчик: проф. Д-р H. Förster 2. Докладчик: проф. Д-р W. Хубав ден на устния изпит: 19 юли 2004 г.
5 Съдържание Списък на съкращенията I Въведение 1 I.1 Колоидни заместители на обема 1 I.1.1 Активен принцип 4 I.2 Характеристика на HES полимера 5 I.2.1 Замяна 5 I.2.2 Разпределение на моларната маса на HES 6 I Средно тегло на моларната маса (Mw) 7 I Средно число на моларната маса (Mn) 8 I Полидисперсност 8 I Моларна маса при максимален пик (Mp) 8 I.3 Използване на HES при животни 9 I.4 Фармакокинетика и метаболизъм на HES 12 I.5 Издание 19 II Материал и методи 20 II.1 Инфузионни разтвори 20 II. 2 Експерименти с животни 20 II.2.1 Животински видове и условия на отглеждане 20 II.2.2 Въвеждане на катетър 21 II.2.3 Инфузия 21 II Процедура по време на инфузията 21 II Определяне на количеството на инфузията 22 II.2.4 Експериментална настройка 22 II.3 Биохимични методи за откриване 24 II.3.1 Концентрация на хемоглобина 24 II.3.2 Хематокрит 24 II.4 Определяне на разпределението на молекулното тегло 25 II.4.1 Теоретична основа 25 II Хроматография на изключване 25 II Откриване на молекулярно тегло 25 II.4.2 Устройства и колони за разделяне 29 I
7 Съдържание III.5.4 III III III IV IV.1 IV.2 IV.2.1 IV.2.2 V VI VII VIII IX Разпределение на молекулното тегло в серум, черен дроб и далак в сравнение 61 Стойности на серум, черен дроб и далак след инфузия на HES 450/0,7 61 Стойности на серум, черен дроб и далак след инфузия на HES 200/0,5 64 Стойности на серум, черен дроб и далак след инфузия на HES 130/0,4 67 Дискусия 69 Модел на животни и клинични наблюдения 69 Разпределение на моларна маса на HES 71 Разработване на методи за определяне на моларна маса на HES 71 HES в серум, черен дроб и далак 74 Резюме 81 Резюме 83 Библиография 85 Списък на фигурите 100 Списък на таблици 103 Приложение 104 Благодарности III
8 Списък на съкращенията Списък на съкращенията Å Ångström A 2 Фиг. СПИН Anon. В или втори вирусен коефициент Фигура Фигура синдром на придобита имунна недостатъчност, заболяване в резултат на инфекция с вируса на човешката имунна недостатъчност. около cm сантиметър d диаметър d ден (и) dh това означава Da Dalton dl децилитър dn/dc индекс на пречупване нарастване DS степен на заместване e основа на естествения логаритъм и др. et alii и др. и т.н. EWG Европейска икономическа общност FELASA Федерация на европейските дружества за лабораторни животински федерации на Европейските лабораторни асоциации за научни животни g грама g центробежно ускорение GPC гел проникваща хроматография i
9 Списък на съкращенията h Hb HES HES-Inf. HKT HPLC HPLC-SEC HsdCpb: WU I 0 Инф. Esp.IU k K kcal kda kg L ТАЛИ LDH Ln M МОЛОВЕ макс. mg min MJ ml mm mmhg час (и) съдържание на хемоглобин хидроксиетил нишесте HES инфузия хематокрит високоефективна течна хроматография високоефективна течност изключване хроматография щам плъх (Wistar Unilever) според интензивността на инфузия на падаща светлина, по-специално международни единици елиминиране константа килограм ъглови килограми нискокалорични Лазерно разсейване на светлината (малки ъглови изследвания на разсеяна светлина) Лактат дехидрогеназа естествен логаритъм Моларна маса Многоъгълно лазерно разсейване на светлината (многоъгълно изследване на разсеяна светлина) максимални милиграми минути мегаджаули милилиметри милиметри живачен стълб ii
10 Списък на съкращенията Mn Брой средно на моларните маси Mp Молекулярна маса в пиковия максимум на диаграмата на елуиране MS Молекулно заместване Mw Средно тегло на моларните маси Mw/Mn Коефициент на полидисперсност n Брой N азот N A NaCl nm No. O 2 p p.a. PAS PC PVP P θ r R θ Avogadro константа натриев хлорид нанометър число кислород вероятност за анализ Период киселина SCHIFF (периодична киселина), реакция напр. за откриване на полизахариди Персонален компютър Поливинилпиролидон частици разсейването функция радиус, разстояние на детектора от обема на разсейване Излишният Rayleigh интензитет съотношение R разсейване (абсолютен разсейване интензитет R θ, разсейване интензивност на колоиден разтвор R θl, разсейване интензивност на разтворител R θ0 на) ВЕИ ретикулоендотелната детектор (индекс на пречупване R θ0) ВЕИ ретикулоендотелната детектор ) с. виж SD стандартно отклонение Хроматография за изключване на размера SEC (хроматография за изключване на размера) SEC-MALLS-HPLC високоефективна хроматография за изключване на течности с куплирано лазерно разпръснато изследване на разсеяна светлина sin sine така наречения (r) iii
11 Списък на съкращенията t Време на таблица, таблица и и други единици U/L на литър обороти в минута v.a. особено V обем срещу Y 0 Y i напр. V D θ λ фиктивна начална стойност във всеки момент от времето t, например ъгъл на компенсиране на обема (на разсеяната светлина) дължина на вълната µ микро µg микрограм µl микролитър Ø средно iv
17 Въведение I.2 Характеризиране на HES полимера Хидроксиетил нишестето се получава от растителен разклонен верижен глюкозен полизахарид амилопектин, който е тясно свързан с ендогенния гликоген. Амилопектинът трябва да бъде химически модифициран, за да може да се получат стабилни разтвори, чиито концентрации са онкологично ефективни. Това се случва напр. чрез въвеждане на хидроксиетил групи, които са свързани с хидрокси групите на въглеродните атоми С2, С3 и С6 на глюкозния пръстен (виж фиг. I-1). Разпределението на молекулното тегло и заместването на нишестето характеризират HES за клинична употреба. Съответно, HES се характеризира със средното си молекулно тегло и заместването му. HES 200/0.5 е HES със средна моларна маса (Mw) на Daltons и моларна субституция (MS) от 50%. Различните препарати се класифицират, от една страна, според тяхното Mw (високо молекулно тегло (
200 kda) и ниско молекулно тегло (
70 kda)), от друга страна, според тяхната MS (силно заместени (0,7), средно заместени (0,5) и ниско заместени (0,4)). Подобно на всички други синтетични колоиди, HES, тъй като се съдържа в разтворите за колоидно заместване на обема, не е еднородно вещество, а се състои от много различни молекули със значителен обхват на разпределение на молекулното тегло и разпределението на заместителите. Следователно HES препаратите, които могат да се различават значително по своите спецификации, могат да бъдат скрити под съпоставими имена. I.2.1 Заместване След частична хидролиза нишестето на изходното вещество се модифицира чрез заместване на хидроксилните групи на захарните остатъци с хидроксиетил групи. Структурната промяна води до две съществени и желани промени в свойствата [38]: 5