Анти-мюлеров хормон (AMH) - Synevo

Главна информация

AMH - член на семейството на растежен фактор β (TGF-β), наричан още Мюлерово инхибиторно вещество - е проучен главно за ролята му в регулирането на мъжката диференциация през ембрионалния период. По този начин, хормонът, произведен от клетките на Сертоли на феталния тестис, индуцира регресия на малерианските канали, първичните елементи на женския репродуктивен тракт, и по този начин допринася за нормалното развитие на мъжките полови органи.

При женските плодове липсва AMH, което води до развитието на женските вътрешни полови органи. В началото на пубертета AMH, подобно на инхибин В, се произвежда от гранулираните клетки на фоликулите на растежа на яйчниците, а не от първичните фоликули, нито от антралните фоликули в последния стадий на растеж (под пряка регулация на FSH). Поради специфичната експресия в гранулираните слоеви клетки на неселектирани фоликули за растеж (потенциално плодородни първични и вторични фоликули), AMH е идеален маркер за оценка на яйчниковия резерв 1 .

AMH упражнява инхибиторен ефект както върху набирането на първични фоликули, така и върху отговора на растежните фоликули към фоликулостимулиращия хормон FSH. Начинът, по който се упражнява хормоналният контрол на секрецията на AMH, не е добре дефиниран. Проучвания, проведени върху животински и човешки модели, показват, че при липса на АМН първичните фоликули се набират с по-висока скорост, така че резервът им се изчерпва преждевременно и менструалният цикъл се прекъсва в по-млада възраст. От друга страна, въз основа на ниското ниво на FSH в присъствието на по-голям брой растежни фоликули, се предполага, че при липса на AMH фоликулите са по-чувствителни към действието на FSH. AMH отслабва увеличаването на FSH-зависимата активност на ароматазата и експресията на LH рецептор. По този начин инхибиторният ефект върху FSH чувствителността на фоликулите може да играе роля в процеса на подбор 2. Смята се, че всеки фоликул има свой собствен праг за концентрация на FSH, който трябва да бъде надвишен, за да се улесни неговият избор. Ниската експресия на AMH във фоликулите ще понижи прага за FSH, което кара фоликулите да продължат да растат и да овулират през следващия цикъл 2; 3 .

С възрастта нивото на AMH намалява непрекъснато при жените в корелация с функционалния резерв на яйчниците. Намаляването му е значително няколко години преди очевидно увеличение на FSH. Поради тази причина AMH може по-добре да идентифицира жени, чиято плодовитост намалява и може да даде насоки за прехода към менопауза през следващите 4 години 4; 5 .

Ролята на AMH като периферен сигнал за увеличаване на размера на фоликулния резерв може да има клинично важни предимства. При пациенти, подложени на лечение на безплодие, стареенето на яйчниците се характеризира с нисък отговор на екзогенното приложение на гонадотропин и намален шанс за бременност. Правилното идентифициране на хора с намален яйчников резерв и следователно лош отговор на стимулиращи лечения е важно, за да се избегне ненужното им включване в програмите за ин витро оплождане. От друга страна, оценката на яйчниковия резерв е полезна при пациенти, които обикновено са изключени от тези програми поради старост 1 .

Няколко проучвания показват, че AMH е много добър маркер за определяне на отговора на яйчниците в програмите за ин витро оплождане. Определянето на хормона в ранната фоликуларна фаза (ден 3 от менструалния цикъл) при група неселектирани пациенти показва, че нивата на АМН са по-ниски при пациенти с лош яйчников отговор в сравнение с тези с нормален отговор, като яйчниковият отговор се определя като броя на възстановени ооцити. Показано е също така, че нивата на серумен AMH корелират в тясна връзка с броя на антралните фоликули преди лечението и броя на ооцитите, възстановени от стимулация на яйчниците 6; .

Липсата на контрол на AMH от FSH е потвърдена както при хора, така и при животни, което предполага, че хормонът действа по-скоро като паракринен фактор, отколкото като системен и не е част от веригата за отрицателна обратна връзка, в която участват гонадотропини. По този начин лечението с висока еднократна доза гонатропин-освобождаващ хормон (GnRH) агонист, което причинява увеличаване на ендогенното производство на FSH и LH, не влияе върху серумните нива на AMH. По същия начин, по време на бременност АМН остава постоянен, той не се влияе от статуса на гонадотропини, отразяващ само фоликуларната популация 1; 7 .

В заключение серумните нива на АМН корелират тясно с броя на антралните фоликули; чрез екстраполация може да се приеме, че те отразяват размера на първоначалния фоликулен резерв. Оценката на яйчниковия резерв е важна както за клиниките за ин витро оплождане, така и за всеки пациент, който се обръща към специалиста, за да оцени потенциала за плодовитост 1 .

В допълнение към ролята си на маркер на яйчниковия резерв, серумните нива на АМН могат да бъдат важни при овариална патология, съответно при синдром на поликистозните яйчници. Въпреки че този синдром обхваща широк спектър от клинични прояви и биохимични характеристики, често срещана аномалия е нарушаването на селекцията на доминантния фоликул с последователна ановулация. Този лош механизъм на селекция води до натрупване на малки антрални фоликули, които допринасят значително за производството на AMH. Предполага се, че при пациенти със синдром на поликистозните яйчници активността на ароматазата може да бъде намалена поради факта, че фоликулите не произвеждат достатъчно естрадиол. AMH също инхибира ароматазната активност, което предполага, че допринася за тежестта на този синдром 1 .

Значителен процент от пациентите със синдром на поликистозните яйчници имат затлъстяване, инсулинова резистентност и компенсаторна хиперинсулинемия. Повишените нива на инсулин са отчасти отговорни за хиперандрогенизма, свързан с този синдром. При тези пациенти лечението с лекарства, които намаляват нивата на инсулин (напр. Метформин) и по този начин индиректно влияят върху производството на андроген, може да има благоприятни ефекти. .

Серумните нива на АМН са повишени при някои пациенти с яйчникови гранулозни тумори; АМН заедно с инхибин А, инхибин В, естрадиол и СА-125 могат да бъдат полезни при диагностицирането и наблюдението на тези пациенти.

При мъжете стойностите на AMH могат да разграничат крипторхизма от анорексията, а при малки деца с генитална неяснота определянето на маркера е полезно за оценка на присъствието и функцията на тестисите. .

AMH структура

Структурно АМН е хомодимерен гликопротеин. Преди да се секретира, хормонът се подлага на гликолиза и димеризация, генерирайки 140 kDa предшественик (proAMH) с две идентични субединици, съединени от дисулфидни мостове. Всеки мономер съдържа голям N-краен про-регион и много по-малък зрял С-краен домен. За разлика от други членове на семейството TGF-β, изглежда, че AMH изисква присъствието на N-терминалния домейн, за да потенцира активността на C-терминалния домейн и да стане биологично активен. По време на цитоплазмен транзит, AMH се разцепва на специфично място между про-региона и зрелия домейн, което води до биологично активни хомодимери: 110 kDa N-краен хомодимер и 25 kDa С-краен хомодимер, които остават свързани в комплекс нековалентен. Рецепторът от тип II за АМН има способността да свързва само биологично активната форма с АМН 10 .

Автоматизираният тест, въведен в нашата лаборатория на платформата Cobas 6000 (Roche Diagnostics), открива общия AMH (както разцепен, така и неклипиран), използвайки две моноклонални антитела, които разпознават съответно зрелия AMH регион и pro-AMH региона. След проучвания, сравняващи AMH тестови методи, резултатите, получени с новия автоматизиран тест, корелират много добре с тези, получени с AMH Gen II ELISA тестове (Beckman Coulter) и AMH/MIS Ansh Labs (коефициент на корелация ≥0,95). Определените концентрации на AMH бяха в низходящ ред: Ansh Labs> AMH Gen II> AMH Roche. Стойностите, получени с AMH Ansh Labs и AMH Gen II, са съответно 30% и 20% по-високи от тези, получени с новия автоматичен тест 11 .

Препоръки за определяне на AMH

- оценка на потенциала за плодовитост: нивата на AMH отразяват състоянието на яйчниците (корелира с броя на антралните фоликули, както и нивата на инхибин В на 3-ия ден от менструалния цикъл); за разлика от FSH и инхибин В, серумните нива на AMH не показват циклични вариации, така че пробата може да бъде взета във всеки ден от менструалния цикъл;

- оценка на феномена на стареене на яйчниците: ниските базални нива на AMH сигнализират за намален яйчников резерв, свързан със слаб отговор на техниките за ин витро оплождане;

- прогнозна стойност при настъпване на менопаузата: нивата на АМН имат предсказваща стойност при инсталирането на преходния период към менопаузата;

- оценка на синдрома на поликистозните яйчници: серумните нива на AMH са повишени при синдрома на поликистозните яйчници и могат да бъдат полезен маркер за оценка на степента на това заболяване 1; 12 .

- диагностика и наблюдение на пациенти с AMH-секретиращи яйчникови гранулозни тумори;

- оценка на малки деца с генитална неяснота или интерсексуалност;

- оценка на функцията на тестисите при деца 9 .

Обучение на пациента - не се изисква специално обучение 12 .

Събран образец - венозна кръв 12 .

Контейнер за прибиране на реколтата Вакутейнер без антикоагулант, с/без отделящ гел 12 .

Необходима е обработка след прибиране на реколтата - серумът се отделя чрез центрофугиране; ако тестът не може да се извърши в същия ден, серумът ще се съхранява при -20 ° C 12 .

Обем на пробата - минимум 0,5 ml ser 12 .

Причини за отхвърляне на доказателствата - интензивно хемолизиран образец 12 .

Стабилност на пробата -6 месеца при -20 ° C; не размразявайте/замразявайте 12 .

Метод –Имунохимия с електрохимилуминесцентно откриване (ECLIA) 12 .

Референтни интервали и интерпретация на резултатите

Референтните интервали са установени върху кавказка популация от видимо здрави възрастни (148 мъже, 93 жени, които не приемат контрацептиви):

• Мъже: 1,43 - 11,6 ng/mL
• Жени:

Установени са и референтни интервали за пациенти със синдром на поликистозните яйчници (тествани 149 жени): 2,41-17,1 ng/ml.

Посочените референтни диапазони представляват процентили 5-95% от стойностите, получени след теста, с изключение на диапазоните за жени във възрастовите категории 35-39 години, 40-44 години и 45-50 години, които представляват процентили 10-90% (поради броя по-малък брой пациенти, тествани в съответните възрастови групи) 12 .

Оценка на яйчниковия резерв

Полезността на този тест за оценка на яйчниковия резерв е изследвана в проспективно многоцентрово проучване чрез тестване на 451 жени на възраст 18-44 години. Получените стойности на AMH корелират с броя на антралните фоликули (AFC), определен чрез трансвагинален ултразвук (измерват се фоликули с диаметър 2-10 mm). толкова много

Както AMH, така и AFC бяха определени на 2-4 ден от същия менструален цикъл.

Създадени са 3 групи AFC:

В зависимост от разпространението в тези групи (15%, 37%, 48%), квантовете за AMH (c1 = 0,681 ng/mL, c2 = 2,27 ng/mL) са изчислени, за да се определят категориите, представени в таблицата по-долу:

AFC 0-7	AFC 8-15	AFC> 15	н
AMH ≤ 0,681 ng/ml	43 (63,2%)	22 (32,4%)	3 (4,4%)	68
0,681 ng/mL	20 (12%)	95 (56,9%)	52 (31,1%)	167
AMH> 2.27 ng/mL	3 (1,4%)	52 (24,1%)	161 (74,5%)	216
н	66	169	215	451

Не са установени референтни интервали за деца и жени> 50 години. За насоки споменаваме стойностите, докладвани от LabCorp (Laboratory Corporation of America) 13:

Жените в менопауза, както и тези с преждевременна яйчникова недостатъчност по някаква причина (включително индуцирана от химиотерапия), имат ниски стойности на AMH, често под границата на откриване на метода.

Туморите на гранулозата на яйчниците секретират в допълнение към инхибиторите A, B и AMH, така че повишените нива на тези маркери могат да показват наличието на такава неоплазма при жени с яйчникова маса. След ефективно лечение маркерите регистрират значително намаляване; повишаването на нивата е показател за рецидив/прогресия на заболяването.

При деца с интерсексуалност повишените стойности на AMH предполагат наличието на тестикуларна тъкан, докато неоткриваемите нива я отричат.

При момчета с липсващ тестис в скротума, откриваемите стойности на АМН най-вероятно показват крипторхизъм, докато неоткриваемите нива предполагат анорексия или необичайно разположена дисфункционална полова жлеза. .

Граница на откриване - 0,01 ng/mL 12 .

Граници и смущения

Стойностите, получени при AMH теста, винаги трябва да бъдат корелирани с клиничната картина и с резултатите от другите изследвания.

Може да причини смущения в някои компоненти на комплекта и да доведе до следните неубедителни резултати:

---