Абстрактен текст 10-ти DGfZ симпозиум 1997 г.
10-ти симпозиум в Хайделберг
23-25 октомври 1997 г.
Резюмета на DGfZ
Резюметата са отпечатани в: Сборник от срещите на DGZ Хайделберг, DKFZ, Хайделберг 1997, ISSN 0949 - 5347

=== УСТНИ ПРЕЗЕНТАЦИИ ===
=== АПОПТОЗА ===
=== АНАЛИЗ НА ИЗОБРАЖЕНИЕТО ===
7-ми. МИКРОСКОПИЯ НА СПЕКТРАЛНА ТОЧНОСТ НА РАЗСТОЯНИЕ В ИЗСЛЕДВАНИЯТА НА ГЕНОМ
C. Cremer * (1,2), H. Bornfleth (1), J. Bradl (1), P. Edelmann (1), A. Esa (1), H. Münch (1), J. Rauch (1) ), Б. Ринке (1), Л. Трахтенброт (3), М. Хаусман (1), Т. Кремер (4,2) (1) Институт за приложна физика и (2) Интердисциплинарен център за научни изчисления (IWR), Университет в Хайделберг, D-69120 Хайделберг; (3) Институт по хематология, Тел. Хашомер/Израел; (4) Институт за човешка генетика към университета в Мюнхен, D-80333 Мюнхен.
* Представящ автор
Очертават се нови методологични подходи, с помощта на комбинация от мултиспектрални техники за молекулярно биологично маркиране с нови оптоелектронни процеси, като конфокална лазерна сканираща флуоресцентна микроскопия или количествена флуоресцентна микроскопия с стимулирано с лазер вълново поле, „високопрецизна спектрална микроскопия“, „висока точност на далечно поле с висока разделителна способност на микроскопията с висока разделителна способност на микроскопията с висока разделителна способност с висока разделителна способност“ Реализирайте обекти. В дългосрочен план се появяват възможности за извършване на светлинно-микроскопски изследвания на пространствената топология на генома в триизмерно запазени („непокътнати“) клетъчни ядра с молекулна разделителна способност „еквивалент“ и по този начин да допринесе за по-задълбочено разбиране на връзката структура-функция на човешкия геном.
=== НАГРАДА KLAUS GOERTTLER ===
=== СТАНДАРТИЗАЦИЯ И КОНТРОЛ ЗА КАЧЕСТВО ===
=== ПЕРИФЕРНА КРЪВ И КОСТЕН МЪРГ ===
32. ЦИТОМЕТРИЧЕН АНАЛИЗ НА ПОТОКА НА АНТИГЕННИ ПЕПТИДИ НА АНТИГЕН-ПРЕДСТАВЯЩИ КЛЕТКИ
D. Kunkel, A. Scheffold и A. Radbruch,
Немски център за ревматизъм в Берлин
За да контролират имунната реакция, Т-хелперните лимфоцити трябва да разпознаят специфичния си антиген под формата на антигенни пептиди, които се обработват от антиген-представящи клетки и се представят върху молекули от клас МНС клас II.
Използвайки хаптенизиран овалбуминов пептид, ние изследвахме представянето на този пептид чрез поточна цитометрия. Демонстрирано е специфичното свързване на пептида с молекулата MHCII. Освен това бяха определени условията, необходими за поемане и представяне, както и връзката между концентрацията на пептид и броя на заредените молекули MHCII на клетка.
Нашите резултати показват, че с помощта на поточна цитометрия е възможно да се открият и отделят антиген-представящи клетки въз основа на представянето на специфични пептиди.
Имфоцитите се филтрират селективно от CPB. Ние заключаваме, че по време на операция клетки с CD3 25 54
фенотипът мигрира в отделни части на организма (самонасочване). Поради повишената им способност да произвеждат и секретират цитокини, тези клетки отчасти могат да бъдат индуктори на локални възпаления и следоперативни CLS. (С подкрепата на саксонското министерство на науката и изкуството).
=== ЕКОЛОГИЧЕН АНАЛИЗ ===
=== НОВИ МЕТОДИ И ПРИЛОЖЕНИЯ ===
=== ПОСТЕРНА СЕСИЯ ===
53. КОЛКО ПЪЛНАТА Е ВАШАТА СЕКЦИЯ? - ОПРОСТЕН МЕТОД ЗА ОЦЕНЯВАНЕ НА ДЕБЕЛИНАТА НА СЕКЦИЯТА НА ПАРАФИНОВИТЕ СЕКЦИИ
Gschwendtner A., Lorenz M., Mairinger T.
Отделение за патология, Университет в Инсбрук, Инсбрук, АВСТРИЯ
Точното измерване на дебелината на парафиновите срезове, използвани за всякакъв вид количествен анализ (напр. ДНК - цитометрия, IHC-оцветяване - количествено определяне, стереологични методи) е важно, за да се получат надеждни резултати. Въпреки че дебелината на сечението може да бъде измерена с голяма точност и точност с помощта на конфокална лазерна микроскопия, такива инструменти са скъпи и не са лесно достъпни за много лаборатории. Тази статия описва прост метод за количествено определяне на дебелината на сечението на непрекъснато обработваната парафинова секция, всъщност използвана за анализ на изображения.
За да се постигне тази цел, дадената секция е разделена на две части, като по-голямата се използва за количествено определяне, докато по-малката се вгражда и резецира през дебелината си. Дебелината на повторно вградената секция вече може лесно да бъде измерена с всякакъв вид устройство за измерване на дължина, достъпно в светлинна микроскопия.
67. ХРОМОЗОМНИТЕ ТЕРИТОРИИ СА ПРОМЕНЛИВИ ПО ВРЕМЕ НА КЛЕТКОВИЯ ЦИКЛ
S.Monajembashi, H.Dittmar, C.Bock и K.O. Greulich
Институт за молекулярна биотехнология, Beutenbergstrasse 11, D-07745 Йена, тел./Факс: ** 49-3641-656409/10
Пространствената корелация и формата на избрани хромозоми (2, 7, 9, X) в междуфазното ядро е изследвана чрез флуоресценция в хибридизация на ситуиране (FISH). Използвана е конвенционална епифлуоресцентна микроскопия и обработка на изображения за визуализиране на цели сонди за боядисване на хромозоми, които са оцветени или с CY3 или CY5. Тъй като лимфоцитите не са синхронизирани, междуфазни ядра в различни фази на клетъчния цикъл могат да бъдат намерени на предметното стъкло.
Могат да се наблюдават два типа изображения: а) в няколко случая хромозомните домейни са силно компактни и ясно отделени един от друг и подредени по двойки хомолози. Хромозомите се появиха на кръг във външния обем на ядрото. Вероятно тези ядра представляват ситуацията, близка до митозата. б) в повечето случаи домейните са по-големи и опаковани по-свободно. Те запълват много по-големи области на клетъчното ядро. Тези резултати показват значителна динамика на хромозомните територии по време на клетъчния цикъл.
71. КАРИОТИП НА ПОТОКА НА ИНТЕРФАЗНИТЕ ХРОМОЗОМИ НА АРАБИДОПСИС ТАЛЯНА
Татяна 1. Самойлова, Армин Майстер и Симон Мизера
Институт по растителна генетика и изследвания на растенията, D-06466 Gatersleben
Съдържанието на ДНК в различни анеуплоидни линии на Arabidopsis thaliana беше определено чрез поточна цитометрия върху DAPI оцветени интерфазни ядра в суспензия и сравнено с дивия тип. Отклоненията на всички линии от дивия тип бяха много лесно възпроизводими и позволиха да се оцени относителното съдържание на ДНК на всяка хромозома на Arabidopsis или на отделни хромозомни рамена.
С изключение на линията с най-малък телотризом (Tr 3A), всички изследвани тризоми показват значителни разлики от дивия тип. От това може да се заключи, че при настоящите експериментални условия могат да бъдат открити разлики, които надвишават 3% от генома на Arabidopsis.
Сумата от всички разлики между отделните тризоми и дивия тип се съгласува добре с очакваното съдържание на ДНК за набора от хаплоидни хромозоми.
74. ГАЛЕКТИН -1 СРЕДСТВЕНОТО ИМУНОСУПРЕСИЯ Е СВЪРЗАНО С ИНДУКЦИЯТА НА АПОТОЗАТА
U. Schulz 1, p Neels 2, J. Brock 2, H. Walzel 2
Институт по имунология 1 Институт по медицинска биохимия 2, Университет в Росток, Германия
Плацентарният галектин -1, член на семейството на галектините на разтворими 13-галактозидни свързващи протеини, инхибира индуцираната от алоантиген и митоген пролиферация на човешки лимфоцити в периферната кръв. Установено е, че медиираното от галектин -1 инхибиране на пролиферацията на човешката левкемична Т-клетъчна линия Jurkat е свързано с повишаване на вътреклетъчната концентрация на калций ([Ca 2+] i) и индуцирането на апоптоза.
Проточните цитометрични измервания разкриват, че лектинът предизвиква зависено от времето и концентрацията увеличение на експресията на фосфатидилсерин, както е установено чрез оцветяване с анексин - V FITC/PJ. Установено е, че тези ефекти върху експресията на фосфатидилсерин са значително намалени в присъствието на лактоза. ДНК фрагментацията се появява в агарозните гелове като стълбищен модел след инкубация на Jurkat Т клетки с галектин -1 в продължение на 6 часа. Тези резултати показват, че галектин -1 модулира имунния отговор чрез индукция на апоптоза в активирани Т клетки.