Тумор некротизиращ фактор (tnf алфа) Synevo Молдова

Информирамтii общи и препоръки за определяне на TNF-α

TNF (фактор на туморна некроза) е провоспалителен цитокин, чието име произлиза от способността да унищожава туморните клетки и да индуцира хеморагична некроза при тумори, трансплантирани на мишки 5 .

TNF-α (казектин) и TNF-β (лимфотоксин) първоначално са описани като цитотоксични фактори, произведени съответно от макрофаги и лимфоцити; Впоследствие беше установено, че TNF-α и TNF-β са два протеина, които показват хомология на 34% от аминокиселинните последователности 3; 5. И двата медиатора действат върху прицелните клетки чрез едни и същи рецептори и поради тази причина имат сходни, но не идентични биологични ефекти.

Генът за TNF-α е разположен върху хромозома 6. При условия на денатурация TNF-α е негликозилиран 17 kDa протеин. Биологично активната форма на TNF-α е тример. В допълнение към тази разтворима форма има и мембранно свързана форма (28 kDa), разположена на повърхността на TNF-α-продуциращи клетки и която служи като резервоар за разтворимата форма, генерирана от протеолитично разцепване 3 .

TNF-α се произвежда не само от макрофаги и моноцити, но и от лимфоцити, мастоцити, неутрофили, кератиноцити, астроцити, микроглии, гладкомускулни клетки и някои туморни клетъчни линии 5. Големи количества TNF се освобождават при контакт на макрофаги, CD4 + Т лимфоцити и клетки естествени убийци (NK) с липополизахариди, бактериални продукти и интерлевкин 1 3 .

TNF-α действа директно чрез два различни повърхностни рецептора, наречени TNFR I и TNFR II, с различни молекулни тегла 3, 4, 5. Тези рецептори могат да бъдат идентифицирани във всички видове клетки, с изключение на еритроцитите. Части от тези рецептори се разцепват от протеази и достигат до извънклетъчната среда, образувайки разтворими рецептори; те действат като ендогенни инхибитори на TNF-α и по този начин регулират нивото на извънклетъчния TNF-α 4 .

Свързването с рецептора на TNF-α води до конформационни промени в рецепторната структура, което води до каскадно активиране на транскрипцията на други протеини, участващи в клетъчната пролиферация, възпалителния отговор и клетъчната апоптоза. TNF-α може да има локално паракринно действие (локалното повишаване на концентрацията на TNF може да причини основните признаци на възпаление: зачервяване, болка, топлина и подуване) или може да действа от разстояние, като ендокринните хормони 5. Поради наличието на своите рецептори в повечето тъкани, TNF-α упражнява голямо разнообразие от биологични ефекти:

цитолитични и цитостатични ефекти върху туморните клетки;
хемотаксичен ефект върху неутрофили 3;
увеличава пропускливостта на ендотелните клетки в региона с възпаление; те не само причиняват натрупването на имунни клетки, но също така оказват влияние върху процеса на коагулация;
активира различни метаболитни процеси в мускулните клетки и адипоцитите, за да осигури енергията, необходима за възпалителната реакция 1;
на ниво макрофаги стимулира фагоцитозата и производството на простагландин Е2;
инсулиновата резистентност се увеличава в други тъкани;
активира остеокластите, така стимулира костната резорбция;
е растежен фактор за фибробластите и стимулира синтеза на колагеназа;
засилва пролиферацията на Т лимфоцити след стимулация с интерлевкин 2 3;
причинява анорексия и треска, действайки като ендогенен пироген 1;
отговаря за синдрома на кахексия, свързан със злокачествени процеси и повечето паразитни инвазии 5 .

Определянето на серумен TNF-α е маркер за системен възпалителен отговор (SIRS), свързан със сепсис, травма и сърдечна недостатъчност. Някои проучвания показват връзката на концентрацията на TNF-α в цереброспиналната течност със степента на активност при множествена склероза; от друга страна, определянето на TNF-α може да бъде полезно при разграничаване на бактериалния менингит от други причини за менингит 1 .

Проучванията върху животни показват, че TNF-α участва в патогенезата на ревматоидния артрит и възпалителното заболяване на червата поради своя възпалителен ефект чрез активиране на ендотелните клетки и индуциране на неутрофилен хемотаксис. Поради тази причина лечението на тези състояния включва и TNF-α инхибитори: или анти-TNF-α моноклонални антитела (инфликсимаб, адалимубаб), или синтетични протеини на рецептор на антитяло, съответно TNFRII-IgG1 (етанерцепт) 5 .

Нивото на TNF-α може да се използва при диагностициране на имунни нарушения и при проследяване на лечението само във връзка с допълнителни клинични и параклинични данни 2 .

Обучение на пациента - на гладно (на гладно) или след хранене 2 .

Събран образец - кръвта ще дойде 2 .

Контейнер за прибиране на реколтата - вакуутан без антикоагулант, с/без отделящ гел 2 .

Количество реколта - минимум 0,5 ml ser 2 .

Причини за отхвърляне на доказателствата - интензивно хемолизиран, жълтеникав, липемичен или бактериално замърсен образец; проби, които не са пристигнали в лабораторията замразени 2 .

Необходима е обработка след прибиране на реколтата - серумът се отделя чрез центрофугиране възможно най-скоро след пълното образуване на изварата и пробата незабавно ще бъде замразена при -20 ° C; проби, събрани извън лабораторните пунктове, ще бъдат транспортирани до контейнера, предназначен за замразени проби .

Тествайте стабилността - серумът е стабилен за 1 месец при -20 ° C; не размразявайте/замразявайте 2 .

Метод - EIA 2 ензимен имуноанализ .

Референтни стойности 12 .

Тълкуване на резултатите

Повишени нива на TNF-α се регистрират при сепсис, травма, автоимунни и хронични възпалителни заболявания (ревматоиден артрит, анкилозиращ спондилит, болест на Crohn, псориазис), инфекциозни заболявания и отхвърляне на присадката 2 .

1. Hans D. Volk, Gernot Keyser, Gerd R. Burmester. Цитокини и цитокинови рецептори. В клинична лабораторна диагностика - използване и оценка на клинично лабораторни резултати. Лотар Томас. TH-Books Verlagsgesellschaft mbH, Франкфурт/Майн, Германия, 1 изд. 1998, 764-772.

2. Лаборатория Синево. Специфични препратки към използваната работна технология през 2010 г. Тип на справка: Каталог

3. Лабораторна корпорация на Америка. Справочник на услугите и тълкувателно ръководство. Фактор на туморната некроза-α. www.labcorp.com 2010. Тип справка: Интернет комуникация.

4. Магда Блек. Възпаление. В Основи в ревматологията. Издателство Amaltea, 2007, 56.

5. Ричард А. МакПетърсен, Матю Р. Пинкус. Имунология и имунопатология. В Henry’s Clinical Diagnosis and Management by Laboratory Methods- Sauders Elsevier 21st-Ed 2007, 867.