Изследване на йонната секреция от епителни клетки - PDF Безплатно изтегляне

Изследване на йонната секреция на епителните клетки Докторска дисертация Demeter Университет Irma Semmelweis Докторска школа по клинична медицина Ръководител: д-р Габор Варга професор, доктор на Унгарската академия на науките Официални съдии: д-р Беата Сперлаг, доктор на Унгарската академия на науките д-р Valáta Kecskeméti Членове на изпитната комисия: д-р Zoltán Vincze, д-р György Simon, доктор на Унгарската академия на науките, кандидат на медицината д-р Péter Hegyi, д-р Будапеща 2009

епителни

СЪДЪРЖАНИЕ СЪДЪРЖАНИЕ СЪДЪРЖАНИЕ. 2 СПИСЪК НА СЪКРАЩЕНИЯТА. 4 Слюнчените жлези. 9 Протеинова секреция. 11 Механизъм на секреция на течности и йони. 12 Регулиране на секрецията. 15 Панкреасът. 18 Механизъм на секреция на протеини. 19 Течна и електролитна секреция. 19 Регулиране на секрецията. 24 ЦЕЛИ. 27 МАТЕРИАЛИ И МЕТОДИ. 28 Използвани клетъчни линии. 28 Материали. 29 Съдържание на решенията. 29 Методи. 30 Поддържане на клетъчна култура, подготовка за измерване. 30 Засаждане. 30 Молекулярна биология. 31 Измерване на ток на късо съединение. 32 Микрофлуорометрия. 32 Статистика. 34 РЕЗУЛТАТИ. 35 Изследване на йонната секреция от Par-C10 клетки. 35 Рецидив на вътреклетъчен ph от ацидоза. 37 Изследване на секрецията на HCO 3. 40 Разследване за наличие на анионни обменници. 42 Изследване на механизмите, регулиращи вътреклетъчните нива на Ca 2+ на клетките Par-C10. 44 2

Съдържание Изследване на механизмите, участващи в секрецията на йони на клетъчната линия на HPAF от панкреатичния канал. 50 Ефект на АТФ върху секрецията. 50 Компенсация за ацидоза. 52 Ефект на инхибиторите. 54 Трансепителна секреция на HCO 3. 58 ДИСКУСИЯ. 60 Изследване на клетки, получени от паротиден ацинус на плъх. 60 Изследване на йонната секреция от клетки Par-C10. Проучване на клирънс 60 Ca 2+ на получени паротидни клетки на плъх Par-C10 63 Изследване на йонната секреция от клетъчна линия, получена от канал на панкреаса. 66 ЗАКЛЮЧЕНИЯ. 69 РЕЗЮМЕ. 71 РЕЗЮМЕ. 72 БИБЛИОГРАФИЯ. 73 СПИСЪК НА ПУБЛИКАЦИИТЕ. 84 ПРИЗНАВАНИЯ. 85 3

Съкращения СПИСЪК НА СЪКРАЩЕНИЯТА ACh ацетилхолин ADP аденозин дифосфат AE анионообменник Ag сребро AgCl сребърен хлорид AQP аквапорин, воден канал ATCC Американски тип колекция от клетъчни култури ATP аденозин-5-трифосфат -ECECb-AM-2,7-BCECF-AM 2,7 5 - (и-6) -Карбоксифлуоресцеин ацетоксиметилов естер НАЙ-ДОБЪР Йон тип канал на бистрофин Br бромиден йон BzATP 3-O- (4-бензоил) бензоил-АТФ СА карбоанхидраза Ca 2+ калциев йон [Ca 2+] i вътреклетъчна концентрация на калциеви йони CaCl 2 калциев хлорид лагер цикличен аденозил монофосфат Capan-1 име на клетъчна линия CCh карбахол, карбамилхолин CCK холецистокинин cdns копие дезоксирибонуклеинова киселина CFPAC-1 име на клетъчна линия CFTR кистозна фиброза трансмембранен регулатор на проводимостта CFTR в -172 CFTR gLC CLC хлорид ion CLC хлорид ion CLC хлорид CLC Калциев йон-активиран хлорид-йон канал CO 2 въглероден диоксид 4

Съкращения CPA циклопиазонова киселина DAG диацилглицерол DMEM/F12 Смес от модифицирана среда на Dulbecco на Eagle и хранителна смес на F12 на DNDS 4,4-динитростилбензен-2,2-дисулфонова киселина E3KARP натриев водороден обменник подтип 3 киназа A -тетраоцетна киселина EGF етраид оцетна киселина EGF гликол тетраацетат EIPA 5- (N-етил-N-изопропил) амилорид ENaC епителни натриеви йонни канали ER ендоплазматичен ретикулум EtBr етидий бромид FBS фетален телешки серум FGF фибробластен растежен фактор GRGF фибробластен растежен фактор 4-диизотиоцианатадихидростилбен 2-киселина-2 R хистаминов рецептор подтип 2 hbest човешки бестрофинов протеин HCO 3 бикарбонатен йон HEPES 4- (2-хидроксиетил) -1-пиперазинетансулфонова киселина HOE-694 3-метилсулфонил-4-пиперидинобензоил гуанидин HPAF име на клетъчна линия, изолирана от човешки панкреатичен I аденокарцином I калиев йон канал IP 3 инозитол трифосфат IRBIT - заедно с IP 3 освободен IP 3-рецептор свързващ протеин I SC ток на късо съединение K + калиев йон KCl калиев хлорид KCC калиев хлорид семейство котранспортер 5

Съкращения KCNK K подсемейство на калиеви канали KCNMA високо проводимост калциев йон активиран калиев йон канал M подсемейство KCNN средно проводимост калциев йон активиран калиев йон канал N подсемейство Kschanthane йонно-висок транспортер KbN изолиран от bic бъбрек бъбрек тип натриев бикарбонат проводящ Ca 2 + -активирано семейство K + канали MEM Минимална съществена среда Mg 2+ магнезиев йон Mg-ATP магнезий аденозин трифосфат MgCl магнезиев хлорид mrns messenger, messenger RNA MSD мембрана зона на проникване Na + натриев йон NaH натрий натрий -бикарбонат NANC неадренергичен нехолинергичен NBC натриев бикарбонат котранспортер NBCn1 електронутрален натриев бикарбонат котранспортер подтип 1 NBD нуклеотиден свързващ регион NCX натриев калций обмен NEAA несъществени аминокиселини NGF неврогенен фактор на растеж NH 4 + - ammni Cl Амониев хлорид NHE Натриев хидрогенен обмен NHERF Натриев хидрогенен обмен Стандарт регулаторен фактор NK неврокинин NKCC натрий калий-2 хлорид котранспортер NMDG + N-метил-D-глюкамин йон 6