Глутатион редокс буфер; llapot; nak анален; zise biol; мента джай; kban - физиол; gi; с; s patol; gi

Един от най-важните компоненти на редокс хомеостазата в клетките е глутатионът. Подходящото съотношение тиол/дисулфид редокс помага за регенерирането на други антиоксиданти, предпазва от оксидативен стрес и неговото присъствие е от съществено значение за образуването на вътреверижни и междуверижни дисулфидни мостове в протеините и по този начин за сгъване на протеини в лумена на ендоплазмения ретикулум (ER). Съотношението на редуциран (GSH) към окислен (GSSG) глутатион също зависи от вида на пробата (тъкан, кръв, серум, клетъчна култура и др.), Както и от състоянието на органела и редокс. Клетъчното съотношение варира в широки граници. Цитозолното съотношение обикновено варира между 30: 1 и 100: 1, но поради специфичната редокс хомеостаза в лумена на ER съотношението е много по-ниско, вариращо от 1: 1 до 3: 1. Правилното съотношение на редокс двойките е от съществено значение за правилното функциониране на клетките, така че точното количествено определяне и съотношението са от съществено значение при биохимичните изследвания.

глутатион

Предизвикателството за анализа е, от една страна, малкото количество налична проба и, от друга страна, нестабилността на измерваните вещества. Общоприет метод за измерване е, че количеството GSSG не се определя пряко, а косвено. Общото количество GSSG се преобразува в GSH и количеството GSSG се извежда от увеличаването на нивата на GSH. Нашата цел беше да разработим метод, при който и двата члена на редокс двойката могат да бъдат определени директно и едновременно. За това е избран HPLC-MS/MS метод. Като се има предвид, че чувствителността на тези устройства може да се промени по време на измерването, особено в случай на сложни биологични матрици, ние също се нуждаем от правилно избран вътрешен стандарт. За тази цел е избран метил GSH.